Diferentes sistemas e fluorescências podem ser utilizados
para a técnica de PCR em Tempo Real. Historicamente, o PCR em
Tempo Real vem evoluindo em relação a quantidade de filtros
e, consequentemente, capacidade de multiplexação de alvos.
Neste senƟ do, um pesquisador pretende desenvolver um ensaio
pentaplex, sem referência passiva, para diferenciar diferentes
patógenos. Visando um ensaio diagnóstico com alta sensibilidade
e especificidade, a combinação de fluoróforos viável em relação
ao espectro de fluorescência de um equipamento de PCR em
tempo Real de 6 canais. É correto afirmar que:
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Em sistemas onde se usa a referência passiva, para uniformizar e normalizar a absorção da fluorescência em toda a placa, o
filtro D (≈610 nm) não fica disponível para a reação multiplex. É
correto afirmar que:
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Atualmente, a PCR em Tempo Real é uma das técnicas mais
utilizadas para diferentes diagnósticos e exames como: identifcação de agentes infecciosos, alterações dos cromossomos, determinação de paternidade, genealogia, identificação de pessoas
ou amostras, síndromes genéticas, propensão a doenças (testes
prediƟ vos) etc. Sobre esta técnica para a fi nalidade diagnóstica
é INCORRETO afirmar que:
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O 6º Padrão Internacional da OMS (Organização Mundial de
Saúde) e National Institute for Biological Standards and Control
(NIBSC), para RNA do vírus da hepatite C (HCV) para técnicas de
amplificação de ácido nucleico (NAT), código NIBSC 18/184, é destinado para a calibração de reagentes de referência secundários
contendo plasma de HCV processado em HCV NAT. O padrão
compreende de plasma humano liofilizado e HCV. O HCV foi
proveniente de uma doação de período de janela positivo para o
genótipo 1a do RNA do HCV de alto título. O padrão foi liofilizado
em alíquotas de 1,1 mL e armazenado a -20 °C. O material foi
calibrado em Unidades Internacionais (UI), em paralelo com o
5º Padrão Internacional da OMS para RNA do HCV para NAT,
em colaboração de um estudo envolvendo 19 laboratórios em
todo o mundo. Apresentação do painel: 257.000 UI/frasco (5,41
log10 UI/frasco).
Incerteza: a unidade atribuída não carrega uma incerteza associada à sua calibração. A incerteza pode, portanto, ser considerada
como sendo a variância do peso do frasco após o enchimento
e foi determinada como sendo de +/- 0,19%. Sobre o painel é
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SHERLOCK é uma ferramenta de diagnóstico MPOC (“Molecular Point of Care)” baseada em CRISPR para detecção de
moléculas únicas de alvos de ácidos nucleicos. Essa metodologia
funciona programando enzimas CRISPR-CAS especiais para detectar a presença de uma assinatura específica de ácido nucleico
em uma amostra através da detecção direcionada no amplicon.
Sobre SHERLOCK é correto afirmar que:
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As complexas questões atuais de pesquisa exigem uma
profundidade de informação que ultrapassa a capacidade das
tecnologias tradicionais da PCR. A terceira geração de PCR, a PCR
digital ou dPCR, reduz essa lacuna por ser uma técnica simples e
prática. Sobre dPCR é INCORRETO afi rmar que:
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No Brasil, segundo a Portaria 34/2014 da ANVISA, o teste de
ácido nucleicos, na triagem de doadores de sangue, tem como
objetivo detectar o material genético do Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV), Vírus da Hepatite C (HCV) e o Vírus da
Hepatite B (HBV), circulante no plasma do doador. Quanto ao
desenvolvimento de novas gerações de ensaios NAT baseados
em metagenômica por Sequenciamento de Nova Geração (NGS)
é correto afirmar que:
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Sabemos que, na prática científica, sempre existirão abreviaturas, acrônimos e siglas, como também termos técnicos
específicos na rotina de laboratório, e que muitas vezes são mencionados rapidamente. Com certeza, há nomes e siglas que são
de fácil entendimento, outras são de uso comum no nosso meio
acadêmico, contudo, existem algumas que não são devidamente
compreendidas, o que pode levar a erros. O desconhecimento do
real significado dos termos pode levar a uma aplicação indevida.
É INCORRETO afi rmar que:
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Um indivíduo masculino de 25 anos, após procurar um
Centro de Testagem e Aconselhamento (CTA) foi diagnosticado
com HIV, sendo encaminhado para o ambulatório de Imunologia
do Hospital Universitário Gaffrée Guinle. Após consulta com o
infectologista, foi realizada a quantificação da carga viral, sendo
104 cópias/mL. Este paciente não apresentava nenhuma contraindicação para o início do tratamento antirretroviral. Os testes de
carga viral se baseiam em genes do HIV, os quais podem ou não
ser alvo de anƟ rretrovirais. A resistência a antirretrovirais pode
acarretar mutações no genoma do HIV. Para os alvos no genoma
do HIV e tratamento indicado para este paciente o correto é:
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