Diferentes sistemas e fluorescências podem ser utilizados
para a técnica de PCR em Tempo Real. Historicamente, o PCR em
Tempo Real vem evoluindo em relação a quantidade de filtros
e, consequentemente, capacidade de multiplexação de alvos.
Neste senƟ do, um pesquisador pretende desenvolver um ensaio
pentaplex, sem referência passiva, para diferenciar diferentes
patógenos. Visando um ensaio diagnóstico com alta sensibilidade
e especificidade, a combinação de fluoróforos viável em relação
ao espectro de fluorescência de um equipamento de PCR em
tempo Real de 6 canais. É correto afirmar que:
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Em sistemas onde se usa a referência passiva, para uniformizar e normalizar a absorção da fluorescência em toda a placa, o
filtro D (≈610 nm) não fica disponível para a reação multiplex. É
correto afirmar que:
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Atualmente, a PCR em Tempo Real é uma das técnicas mais
utilizadas para diferentes diagnósticos e exames como: identifcação de agentes infecciosos, alterações dos cromossomos, determinação de paternidade, genealogia, identificação de pessoas
ou amostras, síndromes genéticas, propensão a doenças (testes
prediƟ vos) etc. Sobre esta técnica para a fi nalidade diagnóstica
é INCORRETO afirmar que:
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O 6º Padrão Internacional da OMS (Organização Mundial de
Saúde) e National Institute for Biological Standards and Control
(NIBSC), para RNA do vírus da hepatite C (HCV) para técnicas de
amplificação de ácido nucleico (NAT), código NIBSC 18/184, é destinado para a calibração de reagentes de referência secundários
contendo plasma de HCV processado em HCV NAT. O padrão
compreende de plasma humano liofilizado e HCV. O HCV foi
proveniente de uma doação de período de janela positivo para o
genótipo 1a do RNA do HCV de alto título. O padrão foi liofilizado
em alíquotas de 1,1 mL e armazenado a -20 °C. O material foi
calibrado em Unidades Internacionais (UI), em paralelo com o
5º Padrão Internacional da OMS para RNA do HCV para NAT,
em colaboração de um estudo envolvendo 19 laboratórios em
todo o mundo. Apresentação do painel: 257.000 UI/frasco (5,41
log10 UI/frasco).
Incerteza: a unidade atribuída não carrega uma incerteza associada à sua calibração. A incerteza pode, portanto, ser considerada
como sendo a variância do peso do frasco após o enchimento
e foi determinada como sendo de +/- 0,19%. Sobre o painel é
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SHERLOCK é uma ferramenta de diagnóstico MPOC (“Molecular Point of Care)” baseada em CRISPR para detecção de
moléculas únicas de alvos de ácidos nucleicos. Essa metodologia
funciona programando enzimas CRISPR-CAS especiais para detectar a presença de uma assinatura específica de ácido nucleico
em uma amostra através da detecção direcionada no amplicon.
Sobre SHERLOCK é correto afirmar que:
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