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FUVEST - 2025 - USP - Especialista em Laboratório (especialidade: Espectrometria de Massas de Amostras Biológicas)
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Q3301399

Química Técnicas de Laboratório ,

Ano: 2025 Banca: FUVEST Órgão: USP Prova: FUVEST - 2025 - USP - Especialista em Laboratório (especialidade: Espectrometria de Massas de Amostras Biológicas) |

Q3301399 Química

Os espectrômetros de massas operam em várias etapas para analisar os íons gerados a partir de uma amostra. Qual das alternativas a seguir descreve uma dessas etapas?

Alternativas

O espectrômetro de massas produz íons a partir de amostras líquidas diretamente no detector em alto vácuo.

Os íons da amostra carregados positivamente ou negativamente são separados com base na conformação espacial no analisador de massas.

Em espectrômetros de massas do tipo tandem, os íons selecionados no quadrupolo são fragmentados em uma célula de colisão, e os fragmentos resultantes são analisados em um segundo analisador.

O detector é responsável por separar os íons com base em sua razão massa/carga (m/z), convertendo os sinais elétricos em abundância relativa.

Os sinais elétricos provenientes dos íons detectados no analisador de massas são transmitidos para o computador para gerar o espectro de massas.

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Q3301400

Química Técnicas de Laboratório ,

Ano: 2025 Banca: FUVEST Órgão: USP Prova: FUVEST - 2025 - USP - Especialista em Laboratório (especialidade: Espectrometria de Massas de Amostras Biológicas) |

Q3301400 Química

A espectrometria de massas emprega diferentes fontes de ionização para analisar uma ampla variedade de moléculas. Sobre as principais fontes de ionização, assinale a alternativa correta.

Alternativas

Ionização por electrospray (ESI) é uma técnica de ionização suave que gera íons da solução em fase gasosa por meio do impacto de elétrons na molécula.

Em ESI, o número de cargas em uma molécula depende basicamente de seu peso molecular e do número de sítios potenciais para protonação, desprotonação ou cationização.

Proteínas e peptídeos ionizados por ESI adquirem uma única carga, o que facilita a caracterização estrutural.

Na dessorção/ionização a laser assistida por matriz (MALDI), o analito deve ser dissolvido em uma solução orgânica volátil antes da ionização, tornando essa técnica ideal para a análise de pequenas moléculas em solução.

Ionização química à pressão atmosférica (APCI) é uma técnica de ionização na qual íons são gerados por descargas corona, sendo mais adequada para compostos de alta massa molecular e pouco voláteis, como proteínas.

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Q3301403

Química Técnicas de Laboratório ,

Ano: 2025 Banca: FUVEST Órgão: USP Prova: FUVEST - 2025 - USP - Especialista em Laboratório (especialidade: Espectrometria de Massas de Amostras Biológicas) |

Q3301403 Química

Como a escolha da fase móvel, da coluna cromatográfica e o uso de aditivos influenciam a separação dos compostos em análises por LC-MS?

Alternativas

A fase móvel e a coluna cromatográfica determinam a eficiência da separação, enquanto os aditivos influenciam apenas a estabilidade da coluna, sem impacto na ionização dos compostos.

A interação entre os analitos e a fase estacionária da coluna é o principal fator na separação cromatográfica, tornando a composição da fase móvel e o uso de aditivos menos relevantes.

A escolha da fase móvel e dos aditivos pode modificar a ionização dos compostos, além de otimizar a separação cromatográfica e melhorar a sensibilidade de detecção dos analitos.

O uso de aditivos na fase móvel tem como principal função ajustar o pH da solução, sem impacto significativo na eficiência da separação cromatográfica ou na ionização dos analitos.

A separação cromatográfica em LC-MS depende exclusivamente da coluna cromatográfica utilizada, sendo desnecessária a escolha criteriosa da fase móvel ou o uso de aditivos na fase móvel.

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Q3301405

Química Técnicas de Laboratório ,

Ano: 2025 Banca: FUVEST Órgão: USP Prova: FUVEST - 2025 - USP - Especialista em Laboratório (especialidade: Espectrometria de Massas de Amostras Biológicas) |

Q3301405 Química

Em análises quantitativas por espectrometria de massas, a escolha do padrão interno adequado influencia diretamente a confiabilidade dos resultados analíticos. Qual das alternativas a seguir descreve o uso de padrões internos?

Alternativas

Os padrões internos devem ter propriedades químicas e físicas diferentes da molécula a ser quantificada, além de serem puros, ausentes na amostra e inertes em relação aos compostos presentes.

O padrão interno deve ser adicionado após a etapa de limpeza ou enriquecimento para evitar alterações na concentração do padrão durante o preparo da amostra.

Os padrões internos isotopicamente marcados corrigem erros relacionados a variações no processo de preparo da amostra, e no volume de injeção mas não corrigem as variações relacionadas a diferenças na ionização (efeito matriz).

Isótopos marcados do analito (isotopólogos) são os padrões internos ideais, pois possuem estrutura idêntica e diferem apenas na massa, garantindo eficiência de ionização e comportamento cromatográfico semelhantes.

Os padrões internos devem eluir em tempos de retenção distintos do analito para que a quantificação seja realizada de forma precisa e seletiva.

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Q3301406

Química Técnicas de Laboratório ,

Ano: 2025 Banca: FUVEST Órgão: USP Prova: FUVEST - 2025 - USP - Especialista em Laboratório (especialidade: Espectrometria de Massas de Amostras Biológicas) |

Q3301406 Química

Considerando a finalidade das diferentes estratégias de identificação e confirmação estrutural baseadas em espectrometria de massas em tandem (MS/MS) e de múltiplos estágios (MSⁿ) e as informações que podem ser obtidas a partir dessas abordagens, assinale a alternativa correta.

Alternativas

A análise MS/MS tem como principal finalidade fornecer a massa exata do composto de interesse, sem a necessidade de estudar padrões de fragmentação ou realizar experimentos adicionais para confirmação estrutural.

As técnicas MS/MS e MSⁿ permitem a fragmentação dos íons precursores, gerando padrões de fragmentação característicos que auxiliam na elucidação estrutural e diferenciação de isômeros.

A técnica MSⁿ é utilizada exclusivamente para análise de compostos voláteis, enquanto a espectrometria de massas em tandem (MS/MS) é aplicada apenas para biomoléculas de alto peso molecular, como proteínas e lipídeos.

As estratégias MS/MS e MSⁿ não são aplicáveis para diferenciação de isômeros ou elucidação estrutural detalhada, sendo utilizadas apenas para identificação preliminar com base na massa do íon precursor.

O uso de espectrometria de massas de múltiplos estágios (MSⁿ) não traz benefícios adicionais em relação à análise convencional de espectrometria de massas (MS), pois a fragmentação repetida dos íons não melhora a identificação de compostos complexos.

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Q3301408

Química Técnicas de Laboratório ,

Ano: 2025 Banca: FUVEST Órgão: USP Prova: FUVEST - 2025 - USP - Especialista em Laboratório (especialidade: Espectrometria de Massas de Amostras Biológicas) |

Q3301408 Química

A figura a seguir apresenta um espectro de massas obtido com ionização no modo eletrospray positivo.

Imagem associada para resolução da questão

Sobre o composto, assinale a alternativa correta.

Alternativas

O espectro de massas mostra a molécula ionizada com 4 cargas positivas.

A massa molecular do composto é aproximadamente 1160,6.

A massa molecular do composto é aproximadamente 580,3.

A massa molecular do composto é aproximadamente 581,3.

A massa molecular do composto é aproximadamente 1162,6.

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Q3301411

Química Técnicas de Laboratório ,

Ano: 2025 Banca: FUVEST Órgão: USP Prova: FUVEST - 2025 - USP - Especialista em Laboratório (especialidade: Espectrometria de Massas de Amostras Biológicas) |

Q3301411 Química

Uma análise por espectrometria de massas possui quatro componentes fundamentais, um sistema para introdução de amostra, uma fonte de íons, um analisador de massas e um detector. Sobre esse assunto, é correto afirmar:

Alternativas

Formas de interface para introdução de amostras no espectrômetro de massas utilizando-se a fonte eletrospray (ESI) são a cromatografia líquida, eletroforese em gel de poliacrilamida e eletroforese capilar.

Após a detecção do íon precursor no modo varredura (MS1), para ser possível a detecção dos fragmentos de uma molécula (espectro de MS2), é necessário aumentar a voltagem da fonte de ionização para gerar fragmentos na fonte.

Para a obtenção do íon molecular de compostos biológicos, pode-se utilizar ionização por elétrons (EI) e sua evolução, ionização por eletrospray (ESI), pois são métodos considerados brandos, não necessitam de derivatização e nem induzem a fragmentação das moléculas, além de ocorrerem a pressão atmosférica.

Moléculas neutras precisam ser ionizadas no analisador de massas para serem detectadas.

A fonte de ionização do tipo MALDI produz íons com poucas cargas (geralmente 1 ou 2), necessitando de um detector capaz de monitorar um intervalo de massas maior para detecção de moléculas com massa alta.

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Q3301413

Química Técnicas de Laboratório ,

Ano: 2025 Banca: FUVEST Órgão: USP Prova: FUVEST - 2025 - USP - Especialista em Laboratório (especialidade: Espectrometria de Massas de Amostras Biológicas) |

Q3301413 Química

Em relação a técnicas de separação acopladas à espectrometria de massas, assinale a alternativa correta.

Alternativas

A cromatografia em fase gasosa é comumente utilizada acoplada ao espectrômetro de massas para deteção de metabólitos. Como muitos metabólitos possuem baixo ponto de ebulição, é necessária uma etapa de derivatização para diminuir a sua volatilidade e permitir que possam ser analisados por GC-MS.

Na cromatografia líquida de alta eficiência utilizando fase reversa, os analitos hidrofóbicos eluem primeiro da coluna cromatográfica, seguidos por compostos polares e muito hidrofílicos.

Para a separação de compostos apolares, tais como lipídeos, utiliza-se comumente a técnica de cromatografia líquida de interação hidrofílica (HILIC), que é uma variação da antiga cromatografia de fase normal, que utilizava sílica como fase estacionária.

A utilização de espectrômetros de massas de alta resolução e acurácia tornou rotineira a análise direta de misturas de analitos sem uma etapa anterior de separação, uma vez que essa metodologia é rápida, de alta repetibilidade e com capacidade de identificar múltiplos isômeros em uma única análise.

A separação de um (ou mais) composto(s) de interesse de outros analitos presentes em matrizes complexas pode ser realizada por cromatografia multidimensional, em que uma ou mais etapas de separação cromatográfica diferentes são realizadas antes da análise por espectrometria de massas (offline), ou acopladas sequencialmente à deteção pelo espectrômetro de massas (online). Uma desvantagem da cromatografia multidimensional online é o maior tempo ocioso do espectrômetro de massas.

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Q3301414

Química Técnicas de Laboratório ,

Ano: 2025 Banca: FUVEST Órgão: USP Prova: FUVEST - 2025 - USP - Especialista em Laboratório (especialidade: Espectrometria de Massas de Amostras Biológicas) |

Q3301414 Química

Sobre modos de identificação e quantificação por espectrometria de massas, é correto afirmar:

Alternativas

No método de aquisição dependente de dados (do inglês, DDA), o instrumento alterna entre um espectro de varredura dos íons precursores que coeluem naquele tempo cromatográfico e a aquisição de espectros de fragmentação, onde o maior número possível de íons precursores é sequencialmente isolado e fragmentado.

No método de aquisição independente de dados (do inglês, DIA), todos os íons precursores em uma janela de m/z predeterminada são fragmentados ao mesmo tempo, o que leva a espectros de fragmentação (MS/MS) complexos, gerando muitos valores faltantes nas análises de dados.

Uma desvantagem do método de DIA em relação ao método de DDA é a necessidade do conhecimento prévio dos analitos de interesse. Entretanto, uma grande vantagem é a maior precisão na quantificação dos analitos.

O conhecimento prévio de uma lista de transições, incluindo íons precursores, bem como de seus fragmentos correspondentes é essencial para definir um experimento de quantificação direcionada (alvo, targeted, comumente chamado de monitoramento de reações em paralelo, do inglês, PRM) em instrumentos híbridos de alta resolução, tais como Q-TOF e Q-orbitrap.

Uma desvantagem de experimentos de quantificação direcionada (alvo, comumente chamado de monitoramento de reações em paralelo, do inglês, PRM) em relação a experimentos não direcionados é que existe a perda de sensibilidade devido aos passos sucessivos de filtro de massas (um para íons precursores e o outro para fragmentos).

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Q3301415

Química Técnicas de Laboratório ,

Ano: 2025 Banca: FUVEST Órgão: USP Prova: FUVEST - 2025 - USP - Especialista em Laboratório (especialidade: Espectrometria de Massas de Amostras Biológicas) |

Q3301415 Química

Em relação à utilização de espectrometria de massas para a elucidação estrutural de uma molécula, é correto afirmar:

Alternativas

A aferição da massa exata permite determinar a fórmula molecular e os grupos funcionais da molécula.

A determinação da sequência de um peptídeo pode ser obtida através da análise dos íons y e b (nomenclatura de Roepstorff-Fohlmann-Biemann) gerados após fragmentação.

Os fragmentos de um íon e suas intensidades são sempre constantes, independentemente da técnica de fragmentação utilizada.

A técnica de fragmentação do tipo dissociação por transferência de elétrons (ETD) é especialmente utilizada para determinar fragmentos do tipo b em peptídeos, mais difíceis de serem obtidos por dissociação induzida por colisão (CID) ou dissociação induzida por colisão de alta energia (HCD).

A espectrometria de massas de múltiplos estágios (MSn) é especialmente apropriada para se obter informações estruturais de uma molécula. A partir do segundo estágio de fragmentação, é necessária a ativação da fragmentação por colisão de alta energia (HCD).

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Respostas

1: C

2: B

3: C

4: D

5: B

6: B

7: E

8: E

9: A

10: B

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Questões de Concurso Público USP 2025 para Especialista em Laboratório (especialidade: Espectrometria de Massas de Amostras Biológicas)

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