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Q2065956

Biologia Moléculas, células e tecidos , Núcleo interfásico e código genético , Estudo dos tecidos ,

Ano: 2016 Banca: PR-4 UFRJ Órgão: UFRJ Prova: PR-4 UFRJ - 2016 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular |

Q2065956 Biologia

Um laboratório quer expressar a amilase salivar de bovinos para fins biotecnológicos. Assinale a alternativa que indica como o isolamento do gene pode ser feito.

Alternativas

A saliva é coletada e incubada com enzimas de restrição específicas para a clonagem do gene da amilase salivar no plasmídeo de interesse.

A saliva é coletada, o material genético total é extraído e incubado com a enzima ligase na presença do plasmídeo de interesse.

É feito um extrato do tecido animal e a proteína de interesse é isolada por técnicas bioquímicas.

O material genético é extraído do tecido animal e é utilizada a técnica de RT- PCR com iniciadores específicos, para amplificar a sequência da amilase salivar.

É feita a cultura de células da glândula salivar e o DNA nuclear contendo o gene de interesse é transferido para a bactéria.

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Q2065955

Biologia Moléculas, células e tecidos , A química da vida ,

Ano: 2016 Banca: PR-4 UFRJ Órgão: UFRJ Prova: PR-4 UFRJ - 2016 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular |

Q2065955 Biologia

Trabalha-se na purificação de uma proteína de 50 kDa. Após uma etapa de precipitação por sulfato de amônio, foi constatada a presença de uma proteína contaminante de 10 kDa. Dos métodos listados a seguir, assinale aquele que é adequado para separação em larga escala.

Alternativas

SDS-PAGE.

Espectrometria de massas.

Ultracentrifugação contra colchão de sacarose.

Cromatografia por gel filtração.

Eletroforese em gel de agarose.

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Q2065954

Biologia Identidade dos seres vivos , Vírus e bactérias ,

Ano: 2016 Banca: PR-4 UFRJ Órgão: UFRJ Prova: PR-4 UFRJ - 2016 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular |

Q2065954 Biologia

Assinale a alternativa que apresenta características dos vetores de expressão baseados em baculovírus.

Alternativas

É um vetor lentiviral utilizado em células eucarióticas.

São vetores de expressão classicamente utilizados em células de inseto, mas que podem ser adaptados para expressão em células de mamíferos.

É obrigatoriamente dependente de mecanismos de seleção, como resistência a antibióticos ou marcadores auxotróficos.

Utiliza o promotor forte da poliedrina, que é derivado de células de insetos.

Por serem pequenos vírus de RNA, não comportam insertos com mais de 500 pb.

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Q2065953

Biologia Identidade dos seres vivos , Vírus e bactérias ,

Ano: 2016 Banca: PR-4 UFRJ Órgão: UFRJ Prova: PR-4 UFRJ - 2016 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular |

Q2065953 Biologia

Assinale a alternativa que descreve corretamente as propriedades de um vetor de expressão de proteínas heterólogas.

Alternativas

Os plasmídeos de expressão em E. coli contêm um mesmo promotor para indução do gene de seleção e do gene heterólogo.

Plasmídeos de expressão em E. coli possuem sítios múltiplos de clonagem, que devem estar entre o promotor indutível e a sequência Shine-Dalgarno.

Geralmente contém uma abundância de sítios de restrição que podem ser escolhidos livremente para clonagem, desde que o gene heterólogo contenha um códon de iniciação e de parada da tradução.

Plasmídeos de expressão em células de mamífero que são destinados à integração no genoma requerem origem de replicação derivado de vírus, como SV40 ou Epstein-barr.

Alguns plasmídeos de expressão em células de mamífero podem ser propagados em E. coli, mas não em células de mamíferos.

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Q2065952

Biologia Moléculas, células e tecidos ,

Ano: 2016 Banca: PR-4 UFRJ Órgão: UFRJ Prova: PR-4 UFRJ - 2016 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular |

Q2065952 Biologia

Assinale a alternativa que apresenta corretamente as vantagens e/ou desvantagens da expressão de proteínas heterólogas em Pichia pastoris.

Alternativas

É um organismo capaz de reproduzir, sempre fielmente, o padrão de glicosilação observado em células de mamífero.

Por ser uma bactéria, o meio de cultura é mais econômico que o utilizado na expressão em células de mamífero.

Na expressão induzida por metanol, não é necessário que a cultura seja bem oxigenada, já que esse é um processo anaeróbio.

É possível fazer a clonagem pelo processo de recombinação homóloga que permite a inserção de cassetes de expressão no DNA genômico.

Como possui parede celular, a proteína é sempre retida na célula, portanto o processo de purificação é mais trabalhoso.

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