Questões de Concurso Para int

A microscopia eletrônica trouxe um grande avanço para a Microbiologia, ela é uma técnica muito utilizada nos estudos dos biofilmes. Devido ao seu alto poder de resolução, de cerca de 0,2 nm, é possível obter informações detalhadas sobre a distribuição e ultraestrutura das células. A figura a seguir mostra o aspecto em microscopia eletrônica de transmissão (MET) e análise elemental do biofilme pré-formado de 90 dias, após 4 (A) e 24 h (B), respectivamente, sobre os corpos de prova imersos em água corrente desaerada sob condições estáticas de fluxo d'água.







Com relação à metodologia, aplicação e imagens fornecidas pela técnica da MET, é correto afirmar que

O conhecimento sobre os biofilmes tem sido adquirido pelas observações microscópicas e por análises bioquímicas e taxonômicas destrutivas que, em geral, alteram a sua estrutura. A microscopia de luz, no entanto, é uma metodologia que pode fornecer informações sobre a extensão e a espessura de uma superfície colonizada, distribuição dos microrganismos e sua atividade fisiológica, entre outras.

A figura a seguir mostra, por microscopia óptica confocal de varredura a laser, uma visão tridimensional de um biofilme, formado após 72 h de incubação do corpo de prova com inóculo de bactérias redutoras de sulfato mesófilas gram-negativas (m-BRS), obtida pelo somatório de cortes ópticos sequenciais de 1 μm de profundidade. Essa análise permitiu estimar em aproximadamente 30 μm a espessura do biofilme aderido sobre a superfície do metal. 






O microscópio óptico confocal de varredura a laser representa um grande avanço na instrumentação microscópica com potencial para estudo de biofilmes bacterianos. Com relação os princípios, fundamentos e uso dessa modalidade de microscopia óptica, assinale a afirmativa incorreta.

Técnicas de microscopia são fundamentais para processamentos de amostras para quantificação e identificação de bactérias, elas possuem ampla aplicação na pesquisa e apresentam vantagens devido à obtenção de resultados rápidos em relação outras técnicas de microbiologia disponíveis que dependem do crescimento de microrganismos. Devido à sua grande especificidade e relativa facilidade de utilização, a microscopia de fluorescência é o método de microscopia mais frequentemente empregado em pesquisa atualmente. Nesse sentido, considerando os princípios, fundamentos e formas de utilização da microscopia de fluorescência, analise as afirmativas abaixo:


I. Com o microscópio óptico de luz equipado para microscopia de fluorescência, é possível examinar a distribuição de uma única espécie molecular em uma amostra e sob condições especiais, e até mesmo detectar moléculas fluorescentes individualmente.


II. A microscopia de fluorescência permite a visualização de moléculas específicas que apresentam fluorescência na presença de luz de excitação branca, infravermelha ou radiação eletromagnética na faixa do visível de baixo comprimento de onda; emitem radiação com comprimento de onda superior à radiação incidente.


III. A grande vantagem da técnica microscopia de fluorescência é o ganho de contraste. Porém, para isso, é necessário um custo adicional com aquisição de equipamentos. Em geral, as moléculas não-fluorescentes são marcadas com um corante fluorescente ou fluorocromo, a fim de torná-los visíveis, como: o DAPI (4’6’-diamidino-2-fenilindol) usado para marcar diretamente o DNA nuclear e a rodadinha, usada para marcar indiretamente filamentos de actina citoplasmática.


Assinale

Diversas comunidades microbianas de bactérias, arqueias, vírus e eucariotos unicelulares têm papéis cruciais no meio ambiente. No entanto, muitos desses microrganismos são frequentemente difíceis de serem cultivados em laboratório, fato que pode confundir a catalogação de alguns desses membros e a compreensão de como as comunidades funcionam. A metagenômica, entretanto, permite realizar em diversos ambientes a comparação de alto rendimento, compreensão da composição e funções das comunidades microbianas

Atualmente, uma tecnologia de sequenciamento de DNA revolucionou a pesquisa genômica e foi capaz de sequenciar o genoma completo de organismos num tempo menor e com mais precisão. Essa tecnologia, que nos estudos com microrganismos substitui a caracterização convencional por morfologia, as propriedades de coloração e os critérios metabólicos, é conhecida por

Os métodos moleculares microbiológicos (MMM) têm sido utilizados como forma de identificar e quantificar os microrganismos presentes nos sistemas de petróleo e têm colaborado com grande auxilio nas etapas de mitigação e monitoramento da biocorrosão. A denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) é uma técnica que utiliza o DNA e a tecnologia de polymerase chain reaction (PCR) para diferenciar as espécies presentes em uma comunidade a partir de uma única amostra. Nesse MMM, os fragmentos de DNA são então transferidos para um gel gradiente desnaturante, separados com base em sua sequência de DNA. O DNA migra através do gel e as diferentes fitas de DNA presentes na amostra serão depositadas em intervalos diferentes no gel, como mostra a figura a seguir:







Considerando os princípios da técnica de DGGE enquanto um MMM para identificar e/ou quantificar os microrganismos agentes da biocorrosão, analise as afirmativas abaixo:


I. O grau de desnaturação da fita de DNA depende de sua composição de sequência de nucleotídeos, os pares de bases A– T são mais fortes do que o par G–C, e a desnaturação parcial resulta em uma diminuição da mobilidade através do gel com a formação de uma banda de DNA.


II. A DGGE separa os produtos por diferenças de sequência de DNA, o grau de desnaturação da fita de DNA depende de sua composição de sequência de nucleotídeos. Portanto, durante a DGGE os produtos com diferentes composições, embora com números semelhantes de pares de bases, irão migrar diferentes distâncias através do gel quando expostos a um gradiente de condições desnaturantes.


III. Um gel com poucas bandas e uma única banda espessa, indica uma comunidade dominada por uma única espécie, e um gel com muitas bandas de intensidade semelhante indica uma comunidade diversa dentro de uma espécie. A comparação das comunidades em diferentes amostras, de diferentes locais ao longo de um sistema de processo, fornece informações significativas sobre os ambientes ao longo do processo e como isso afeta as populações microbianas.

Assinale