Questões de Biomedicina - Análises Clínicas - Métodos Analíticos: Fotometria, Colorimetria, Espectrofotometria, Turbidimetria, Nefelometria, Eletroforese de Hemoglobinas e Proteínas, Cromatografia para Concurso
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As proteínas e os ácidos nucleicos isolados da célula são frequentemente separados pela técnica de cromatografia em coluna. Esta técnica baseia-se em fazer uma mistura de proteína dissolvida em água passar por uma coluna constituída por uma matriz sólida e porosa, contida num tubo de vidro. A velocidade de migração das diferentes proteínas varia conforme a interação de cada uma com a matriz. De acordo com o grau e o tipo de interação da proteína com a matriz, marque V para as afirmativas verdadeiras e F para as falsas.
( ) Interação por afinidade: técnica, por exemplo, muito usada para purificação de anticorpos. Nesse procedimento, as moléculas (anticorpos) ligam-se às partículas da matriz que contêm o respectivo antígeno.
( ) Interação de troca iônica: a matriz é constituída por partículas com carga positiva ou negativa e na qual a separação das proteínas depende das cargas elétricas no interior de suas moléculas.
( ) Interação hidrofóbica: as partículas da matriz apresentam superfície hidrofóbica, retardando a migração das proteínas hidrofílicas, que têm afinidade pelas partículas da matriz.
( ) Filtração em gel: a matriz atua apenas como uma peneira, por onde as proteínas migram com velocidade variável, dependendo do tamanho e forma de suas moléculas.
( ) Interação por afinidade: muitas moléculas biológicas interagem com alto grau de especificidade, como ocorre entre enzimas e seus substratos.
A sequência está correta em
I. A eletroforese é um método analítico para a separação de substâncias, assim como a cromatografia líquida de alta eficiência e a cromatografia gasosa. A diferença principal entre elas é apenas o detector analítico pois o princípio do método é exatamente o mesmo.
II. Os métodos turbidimétricos e nefelométricos são métodos de absorção que medem a quantidade de luz retida ou espalhada por uma suspensão. As amostras podem ser quantificadas em função da turbidez apresentada.
III. Os métodos espectrométricos podem ser divididos em de absorção como a espectrometria no UV visível ou no ultravioleta e no infravermelho; e podem ser de emissão como por exemplo a espectroscopia de emissão por fotometria de chama e a fluorimetria.
IV. A espectrometria de massas é um método analítico para identificar moléculas através de suas massas ou pesos moleculares. Consiste em vaporizar o material sob vácuo submetido a um feixe de elétrons de alta energia. Infelizmente, é muito restrita, e não pode ser utilizada para materiais inorgânicos não-voláteis.
Dos itens acima, estão corretos, apenas:
(Disponível em: http://www.biowiki.com.br/img/Biotecnologia/Biotecnologia_eletroforese.jpg)
As bandas obtidas no gel de eletroforese, com distâncias iguais em relação ao ponto de aplicação da amostra, indicam moléculas de DNA com
I. A Nefelometria é uma técnica frequentemente empregada para medir as concentrações de IgA, IgM e IgG entre outras proteínas plasmáticas. II. A Nefelometria mede a redução da luz ao passar por um complexo antígeno-anticorpo, ou seja, mede o quanto esta solução absorve luz e o quanto ela deixa passar. III. A principal diferença entre nefelometria e turbidimetria é que, na nefelometria, a luz dispersa que atravessa a solução é medida, enquanto que na turbidimetria a luz não é difundida(a absorvida) é medida.
Está (ão) correta(s) apenas:
Nefelômetro é um equipamento capaz de detectar luz espalhada em diversos ângulos.
A potenciometria, técnica que utiliza princípios eletroquímicos, é utilizada para medição de pH em análises clínicas.
Enquanto as espectroscopias de absorção no ultravioleta e no visível monitoram as transições rotacionais das moléculas, a espectroscopia de infravermelho detecta as transições vibracionais das mesmas.
Todos os tipos de radiação eletromagnética apresentam o fenômeno da difração.