Questões de Concurso
Sobre técnicas sorológicas e de imunofluorescência em biomedicina - análises clínicas
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Em relação ao método de ELISA, analise as afirmativas a seguir e assinale (V) para a verdadeira e (F) para a falsa.
( ) O método de ELISA indireto possui vantagens e desvantagens em relação ao método direto. Uma das vantagens é a maior sensibilidade, uma vez que a técnica amplifica o sinal detectado.
( ) O método competitivo de ELISA para pesquisa de antígenos, consiste na adição de anticorpos marcados com enzimas em uma reação, onde competirão com os antígenos da amostra clínica por anticorpos imobilizados na fase sólida.
( ) O método de ELISA direto para captura de antígenos, consiste na utilização de anticorpos imobilizados em uma fase sólida que reagirão com antígenos presentes na amostra clínica. Os antígenos ligados aos anticorpos imobilizados são então detectados por anticorpos diretamente conjugados às enzimas de revelação.
As afirmativas são, na ordem apresentada, respectivamente,
I - Swabs podem ser usados para coletar secreções de orofaringe, ocular, material genético, procedimentos ginecológicos.
II - Swabs podem ser usados no controle de qualidade, para testes de amostragem de higiene, limpeza, descontaminação do ambiente, de equipamentos em hospitais e até de algumas indústrias.
III - Swabs não podem ser utilizados com meios de cultura por que os mantém úmidos e prejudica a coleta de secreções.
- Os princípios de vacinação podem ser resumidos em: ___________________de linfócitos específicos para expandir as reservas e células de memória.
- O uso de formas inofensivas de _________________organismos atenuados, fragmentos subcelulares, toxoides ou vetores
- O uso de ____________________ para aumentar as respostas imunes. E a ______________ de vacinas seguras e acessíveis para promover ________________________________.
I. A amostra utilizada na técnica de imunofenotipagem de células sanguíneas é o soro ou o plasma.
II. Para os analitos que precisam ser mantidos sob refrigeração, a centrífuga deve ser refrigerada.
III. A centrifugação usualmente utilizada é entre 1.000-1500 x g por 10 a 15 minutos.
IV. Para a realização dos imunoensaios como ELISA, por exemplo, o anticoagulante EDTA não é indicado.
V. Alterações na temperatura e no tempo de centrifugação, assim como na velocidade de rotação podem causar hemólise da amostra.
VI. Para a maioria dos imunensaios, amostras lipêmicas, ictéricas, congeladas e descongeladas repetidamente não causam interferência.
Marque a opção CORRETA.
I. Os fluorocromos são moléculas reveladoras ou fluorescentes ligadas covalentemente a anticorpos ou a antígenos;
II. Os fluorocromos devem ser armazenados no congelador (freezer) a uma temperatura de -10 °C;
III. A ficoeritrina (PE) é uma proteína fluorescente bastante utilizada nas técnicas de imunofluorescência;
IV. Os fluorocromos são moléculas que absorvem luz em um comprimento de onda maior e baixa energia e emitem luz em um comprimento de onda menor e elevada energia;
V. Para testes em humanos, as moléculas fluorescentes podem ser ligadas a imunoglobulinas anti-humanas que foram produzidas em camundongos ou ratos, por exemplo.
Marque a opção CORRETA.
Julgue o item a seguir.
Para o diagnóstico de sífilis, somente é recomendado o
uso de testes treponêmicos que detectam anticorpos
totais (IgG e IgM), pois, diferentemente de outros agravos,
como a toxoplasmose, a utilização de testes que
detectam isoladamente anticorpos IgM (ex.: FTA-Abs
IgM) não é útil como marcador de infecção recente. Essa
limitação se justifica porque, no diagnóstico de sífilis, os
anticorpos IgM são detectados tanto como primeira
resposta imune humoral pós-infecção quanto durante o
período latente e em pacientes com doença tardia.
Julgue o item a seguir.
De acordo com a Organização Mundial de Saúde, o
diagnóstico padrão ouro para identificação do vírus
SARSCoV-2 é realizado por meio das técnicas de reação
em cadeia da polimerase com transcrição reversa com
amplificação em tempo real, ou RT-PCR, e
sequenciamento parcial ou total do genoma viral. As
amostras para esta análise podem ser obtidas por meio
do aspirado nasofaríngeo, swab nasal e oral, bem como
pela secreção respiratória do trato inferior, como escarro,
lavado traqueal ou lavado broncoalveolar. O ideal é que a
coleta seja realizada após o surgimento dos sintomas,
entre o terceiro e o quinto dia.
Julgue o item a seguir.
A imunofluorescência indireta é o teste de referência na
sorologia de muitas doenças, como as infecciosas e
autoimunes. O mesmo conjugado pode ser utilizado em
sistemas diferentes. Um passo de lavagem é realizado e
um anticorpo anti-humano (conjugado) marcado com
substância fluorescente é adicionado. Após um segundo
passo de lavagem, para remover o conjugado não ligado,
a observação de fluorescência ao microscópio é
indicativa da presença do anticorpo em estudo na
amostra do paciente. O conjugado é isotipo-específico,
sendo assim possível distinguir reações condicionadas
pela presença de IgG, IgA e IgM. O teste é muito utilizado
para a pesquisa de autoanticorpos em doenças difusas
do tecido conjuntivo, nas vasculites sistêmicas (ANCA) e
no diagnóstico de infecções pelo Treponema pallidum,
Tripanosoma cruzi, para as diversas Chlamydiae.
Julgue o item a seguir.
Apesar de não serem utilizados como primeira escolha
para pesquisa da Doença de Chagas, os exames
sorológicos podem ser reagentes na fase aguda, ainda no
primeiro mês de infecção, o que adiciona complexidade
ao diagnóstico diferencial entre as fases aguda e crônica.
A metodologia recomendada para confirmação de caso
agudo pela pesquisa de imunoglobulina M é a
imunofluorescência indireta (IFI). Já para a pesquisa de
imunoglobulina G, podem ser utilizados o ensaio de
imunoabsorção enzimática (ELISA) e/ou a
hemaglutinação indireta (HAI) e/ou a IFI, entre outras
técnicas.
Julgue o item a seguir.
Os testes rápidos chegaram como uma solução prática,
capaz de levar exames laboratoriais
epidemiologicamente importantes até serviços de saúde
que estão longe dos grandes centros de hospitais e
laboratórios. Uma das metodologias utilizadas é a
imunocromatografia, na qual a amostra é depositada no
local indicado do exame, junto com uma solução-tampão
e aguardar o tempo de reação. Em geral, essa técnica
visa a detectar as Imunoglobulinas IgM e IgG, ou seja,
identifica a presença dos anticorpos que são produzidos
pelo organismo para combater a infecção. Essa
metodologia está sendo amplamente utilizada para
detecção do antígeno SARS-Cov-2 da COVID-19, sendo
útil em amostra coletada até o terceiro dia de início dos
sintomas.
Julgue o item a seguir.
Logo após a descoberta do HIV, foram desenvolvidos
imunoensaios (IE) para o diagnóstico da infecção. Nas
últimas décadas, quatro gerações de IE foram
desenvolvidas. O ensaio de quarta geração detecta
simultaneamente o antígeno p24 e anticorpos específicos
anti-HIV. O componente de detecção de anticorpo tem o
formato de “sanduíche”; portanto, detecta todas as
classes de imunoglobulinas contra proteínas
recombinantes ou peptídeos sintéticos derivados das
glicoproteínas gp41 e gp120/160. O componente de
detecção de antígeno p24 é constituído por um anticorpo
monoclonal na fase sólida (para capturar o antígeno p24
presente no soro) e de um conjugado constituído por um
antissoro (anticorpo) poliespecífico contra a proteína p24.
Em média, a janela diagnóstica dos ensaios de quarta
geração é de aproximadamente 15 dias, dependendo do
ensaio utilizado.
Sobre os testes NAT é correto afirmar que:
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