Questões de Técnicas em Laboratório - Técnicas Sorológicas e de Imunofluorescência com Ênfase no Diagnóstico Imunológico das Doenças Humanas para Concurso

O Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay (ELISA) é um ensaio enzimático comumente utilizado nos laboratórios de análises clínicas e de pesquisa. Sobre o ELISA, é correto afirmar que:

O teste de VDRL é um teste não treponêmico para determinação qualitativa e semi-quantitativa de reaginas no soro ou plasma do paciente. Para tanto, é necessária a utilização de uma placa para se misturar a amostra do paciente com o reagente do teste. Como é chamada essa placa?

Paciente do sexo masculino, com 23 anos de idade, usuário de drogas endovenosa nos últimos seis anos, foi atendido no serviço de emergência de um hospital apresentando acentuadas astenia e icterícia. Segundo o paciente, a sintomatologia havia iniciado há dez dias quando foram observadas colúria, hipocolia fecal, dores musculares e cansaço que se agravaram até uma profunda prostração.

Exame clínico: Hepatomegalia.

Exames bioquímicos:
ALT= 480 UI/L; AST= 745 UI/L.

Marcadores virais:
IgM anti-HAV: Reagente
HBsAg: Não Reagente
IgM anƟ -HBc: Não Reagente
antiHBc: Não Reagente
anƟ -HBs: Reagente
anti-HCV: Reagente
HCV RNA: Reagente

Com relação aos marcadores virais descritos acima, podemos afirmar que o paciente apresenta: 

Ao final da dé cada de 1980, chegaram ao mercado os testes rápidos. Com o avanço das tecnologias de desenvolvimento e produção, esses testes revelaram-se eficientes na investigação de doenças infectocontagiosas. São chamados de testes rápidos os ensaios de triagem que produzem resultados em, no máximo, 30 minutos, de fácil execução e dispensando infraestrutura laboratorial. Apesar da metodologia simples, estes produtos são baseados em princípios técnicos relativamente complexos para oferecer a oportunidade de acesso a resultados importantes obtidos longe de grandes hospitais ou instalações laboratoriais, onde há́ necessidade de obtenção de resultados de forma imediata.
Em relação aos testes rápidos, avalie se são verdadeiras (V) ou falsas (F) as afirmativas a seguir:

I - O teste rápido tradicional é um ensaio que se vale da tecnologia de imunocromatografia de fluxo lateral (Lateral Flow, LF), realizado a partir de amostra de sangue total venoso ou obtido a partir de punção digital, de soro ou plasma.
II - Nos testes rápidos para detecção de anticorpos várias nanopartículas são usadas como marcadores biológicos, sendo as de ouro coloidal as mais utilizadas em sistemas biotecnológicos devido às suas excelentes características físicas e químicas.

III - Nos testes rápidos, a capacidade de detecção pode ser antecipada e a sensibilidade pode ser ampliada com a alteração dos insumos utilizados visando à detecção de antígenos ao invés de anticorpos. O princípio básico do teste permanece o mesmo, mas a membrana recebe anticorpos (geralmente monoclonais) que reconhecem com avidez os antígenos.

As afirmativas I, II e III são respectivamente: 

A técnica de imunofluorescência (IF) geralmente é utilizada para confirmação sorológica nos casos em que as reações antígeno – anticorpo podem ser observadas a partir da utilização de um fluorocromo conjugado às regiões da fração cristalizável (Fc) de uma molécula de anticorpo. Os complexos imunes contendo estes anticorpos marcados podem ser detectados pela emissão de luz fluorescente, quando excitadas por um feixe de menor comprimento de onda, que pode ser vista com o auxílio de um microscópio de fluorescncia após imobilização do material em lâminas.

Sobre este tema observe as afirmativas a seguir:

I - A técnica de imunofluorescência pode ser realizada em uma variedade de materiais clínicos, sempre que houver a presença de células que potencialmente possam estar infectadas com o vírus ou parasita de interesse.

II - Os materiais mais comumente utilizados para IF são: células de cultivo (após a inoculação com o material suspeito), tecidos de  necropsia ou biópsia (impressão direta de tecido na lâmina-clap), tecidos congelados e cortados no criostato (tecidos fixados em formol e incluí dos em parafina), células sanguíneas (leucó citos) e células presentes em secreções (nasais, prepuciais, vaginais, e no leite).

III - Na IF indireta, geralmente utiliza-se anticorpo policlonal, ou anticorpos monoclonais marcados com fluoresceína para detecção de antígenos. A IF indireta tem como vantagens a rapidez e simplicidade, por exemplo, em alguns protocolos o resultado é obtido em menos de uma hora.

IV - Na IF direta o material a ser analisado é fixado em lâminas de microscópio. As células (portadoras de antígenos) são incubadas com o soro que se deseja testar, sendo então tratadas com outro soro que contenha anticorpos específicos para imunoglobulina humana (anti-Ig) conjugada a um fluorocromo, como a fluoresceína. A presença de anticorpos é revelada por meio de microscopia de fluorescência.

Das afirmativas acima, apenas: