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FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
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Q566144

Biomedicina - Análises Clínicas Bioquímica em Biomedicina ,

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica |

Q566144 Biomedicina - Análises Clínicas

Com relação a aplicações e limitações da análise proteômica quantitativa, assinale a afirmativa incorreta.

Alternativas

a detecção de fosfoproteínas e a comparação de sua distribuição entre duas situações experimentais constitui a base da análise fosfoproteômica.

Dentre as modificações pós-traducionais de grande relevância biológica, as glicosilações são atualmente uma das grandes limitações da análise proteômica, uma vez que ainda não é possível a identificação destas modificações nestas abordagens.

Experimentos que detectam a presença de proteínas modificadas por ubiquitinação ou SUMOilação podem ser acoplados à análise proteômica quantitativa de forma a gerar um painel de proteínas passíveis de sofrerem estas modificações.

O isolamento de organelas e subsequente análise das proteínas presentes por meio de estratégias proteômicas, possibilita a realização de sub-proteomas celulares que permitem a identificação do conjunto de proteínas que compõem as distintas organelas. Esta caracterização possibilita ainda, com a aplicação de análises subsequentes, a determinação de sequências de direcionamento que operam no tráfego de proteínas nas células eucarióticas.

Proteínas com baixa abundância relativa, proteínas de alto peso molecular e proteínas associadas a membranas apresentam o maior grau de dificuldade de detecção nas análises proteômicas.

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Q566145

Biomedicina - Análises Clínicas Bioquímica em Biomedicina ,

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica |

Q566145 Biomedicina - Análises Clínicas

A análise proteômica e a proteômica quantitativa são áreas da química de proteínas que vem se desenvolvendo com grande rapidez ao longo dos últimos anos. Sobre o tema, assinale a alternativa incorreta.

Alternativas

Uma vantagem da análise proteômica sobre a análise da expressão gênica no nível de RNA é que a proteômica identifica produtos gênicos que são de fato expressos e não apenas mRNAs que podem não ser traduzidos.

Uma das grandes limitações atuais da análise proteômica reside no número de proteínas que pode ser analisada em cada experimento, que sempre representará apenas uma fração das proteínas expressas em determinada situação.

A análise proteômica é limitada a proteínas solúveis, não sendo aplicável a proteínas mais complexas como as proteínas de membrana.

A análise proteômica permite a detecção de modificações pós-traducionais, o que amplia a relevância biológica dos dados obtidos.

Um dos pré-requisitos básicos da proteômica é que o organismo analisado já tenha seu genoma sequenciado, ou pelo menos uma boa coleção de cDNAs esteja disponível.

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Q566146

Biomedicina - Análises Clínicas Bioquímica em Biomedicina ,

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica |

Q566146 Biomedicina - Análises Clínicas

Sobre a realização de análises de proteômica quantitativa, assinale a alternativa correta.

Alternativas

Proteínas, ou seus peptídeos, derivados de uma amostra experimental são marcados com um ou mais isótopos estáveis, misturados com uma amostra controle não marcada e em seguida digeridos proteoliticamente e analisados em espectrometria de massa.

A diferença na assinatura de massas entre uma amostra marcada e não marcada servirá para identificar os polipeptídeos marcados de seus controles cognatos.

A intensidade do sinal da espectrometria de massa das amostras de peptídeos diferencialmente marcados pode ser utilizada para determinar sua abundância relativa em cada uma das condições experimentais analisadas.

São exemplos de métodos de marcação isotópica a marcação metabólica estável, a adição de massa ou de isótopos por meio de reações químicas e a introdução de isotópos estáveis por meio de reações enzimáticas.

Uma grande limitação da proteômica quantitativa reside na impossibilidade de utilização de marcação multiplex, limitando as análises a um tipo de isótopo ou etiqueta molecular por vez, o que, por sua vez, limita a comparação a apenas duas condições experimentais.

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Q566147

Biomedicina - Análises Clínicas Bioquímica em Biomedicina , Métodos Analíticos: Fotometria, Colorimetria, Espectrofotometria, Turbidimetria, Nefelometria, Eletroforese de Hemoglobinas e Proteínas, Cromatografia ,

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica |

Q566147 Biomedicina - Análises Clínicas

Com relação à espectrometria de massa, assinale a alternativa incorreta.

Alternativas

A fragmentação dos peptídeos na célula de colisão ocorre de maneira imprevisível e aleatória, gerando em geral fragmentos de aminoácidos que não são utilizados para a identificação das proteínas.

No analisador, os peptídeos são separados em função da razão massa/carga (m/z).

Diferentes componentes do espectrômetro são mantidos a vácuo para evitar o movimento indesejado de íons.

Um espectrômetro de massa contém três unidades básicas, uma fonte de ionização, um analisador e um detector.

Na célula de colisão, os íons colidem com um gás (em geral He, Ar ou Ne), resultando na fragmentação do íon.

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Q566148

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica |

Q566148 Biomedicina - Análises Clínicas

Nas análises rotineiras de eletroforese bidimensional, após a ruptura dos tecidos e/ou das células, as proteínas são solubilizadas e desnaturadas em soluções contendo detergentes não iônicos ou zwiteriônicos, agentes caotrópicos e pequenas quantidades de agentes redutores, para posterior análise em gel. Assinale abaixo a única alternativa que não descreve exemplos, respectivamente, destas três classes de substâncias.

Alternativas

Triton-X100, tiouréia e β-mercaptoetanol.

Duodecil sulfato de sódio, uréia e Ditiotreitol.

Triton X-100, hidrocloreto de guanidina e Ditiotreitol.

CHAPS (3-[(3-Cloroamidopropil)dimetilamônio]-1 propanosulfonato), uréia e iodoacetamida.

sulfobetaínas, tiouréia e β-mercaptoetanol.

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