Questões de Concurso Público FIOCRUZ 2010 para Tecnologista em Saúde - Proteômica

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Q566123 Biomedicina - Análises Clínicas
Interessado no estudo funcional de uma proteína quinase receptora, você foi encarregado de preparar uma série de mutações pontuais que pudessem interferir com a atividade desta quinase e com isso contribuir para o esclarecimento de aspectos importantes de sua participação nos processos de transdução de sinal. Sabendo-se que a quinase em questão é do tipo treonina quinase, e que o sítio ativo dessa enzima contém um resíduo de Treonina (Thr418) que ativa a quinase quando sofre auto-fosforilação, assinale abaixo a sequência de mutantes que poderão produzir, respectivamente, uma quinase inativa e uma quinase constitutivamente ativa:
Alternativas
Q566124 Biomedicina - Análises Clínicas
Durante o ciclo de vida de uma célula eucarionte, seu material genético nuclear se estrutura na forma de cromossomas, que podem apresentar diferentes graus de condensação. Analisando o grau geral de compactação desta molécula ao longo do ciclo celular, podemos dizer que nas fases G1, S e Metáfase, respectivamente, o DNA se apresentará um grau de compactação:
Alternativas
Q566125 Biomedicina - Análises Clínicas
Os RNAs mensageiros eucariontes apresentam diferentes regiões, cada uma deles com funções específicas durante o tempo de vida desta molécula. Assinale a alternativa que contém as principais funções das regiões 5' e 3' de um RNA mensageiro:
Alternativas
Q566126 Biomedicina - Análises Clínicas
Assinale a alternativa que explica corretamente o que deve acontecer com uma região de cromatina condensada que tem suas moléculas de Histona H1 fosforiladas:
Alternativas
Q566127 Biomedicina - Análises Clínicas
Trabalhando com o isolamento de um gene de humanos, um pesquisador desenvolveu duas estratégias de clonagem, utilizando como sonda um gene homólogo isolado de camundongos. Na primeira delas, ele utilizou como material inicial o DNA extraído de culturas de células de fibroblastos, resultando na obtenção do clone A. Na segunda abordagem, ele utilizou uma preparação de RNA mensageiro de células renais, resultando na obtenção do clone B. Considere ambas as estratégias bem sucedidas que possibilitaram a clonagem do mesmo gene.

 Experimento 1 – caracterização dos elementos que regulam a expressão tecidual do gene.

Experimento 2 – expressão do gene em bactérias para purificação da proteína codificada pelo gene isolado.

Experimento 3 – isolamento de genes de proteínas que interagem com a proteína codificada pelo gene isolado através do sistema Duplo Híbrido em leveduras.

Selecione o clone que deverá ser utilizado, respectivamente, para cada um dos experimentos listados acima.

Alternativas
Q566128 Biomedicina - Análises Clínicas
Um pesquisador interessado no estudo da regulação da expressão tecidual de um gene preparou fusões de diferentes segmentos da região promotora regulatória deste gene, fusionada a um gene repórter marcador. Cinco construções diferentes foram obtidas e introduzidas no cromossoma do organismo, por meio de transformação genética estável. Após a análise do padrão de expressão do gene marcador nos animais transgênicos transformados com estas construções, os seguintes resultados foram obtidos:

 Imagem associada para resolução da questão

Analisando os resultados apresentados podemos concluir que os elementos reguladores responsáveis pela expressão do gene em Fígado, Coração e Neurônios estão localizados, respectivamente, entre as posições: 


Alternativas
Q566129 Biologia
A interação de ligantes extracelulares com receptores presentes na membrana plasmática das células em geral levam a uma cascata de transdução de sinal que sinaliza, para o meio intracelular, as mudanças do meio extracelular, percebidas ao nível da membrana. Comumente, essa ligação leva a um aumento ou a um decréscimo temporário de moleculas intracelulares, denominadas mensageiros secundários. Assinale a alternativa abaixo que contém moléculas que podem ser considerados exemplos de mensageiros secundários.
Alternativas
Q566130 Biomedicina - Análises Clínicas
Visando a caracterização de uma via de transdução de sinal, mediada por um novo hormônio, um pesquisador foi encarregado de isolar mutantes defectivos na percepção deste hormônio, e que desta forma pudessem ser úteis na caracterização desta via de sinalização. Uma vez que este hormônio induzia o alongamento das células, o pesquisador desenvolveu um método de seleção de mutantes baseado na identificação de células que apresentassem alterações no processo de elongação celular. Após a realização deste experimento, foram isolados dez mutantes com características de elongação alterada. Buscando selecionar dentre estes dez mutantes os que melhor serviriam para caracterizar a via de transdução de sinal, o pesquisador realizou um segundo experimento, no qual o hormônio em questão foi aplicado nas culturas celulares mutantes. A tabela abaixo representa os resultados obtidos nestes dois experimentos.

Imagem associada para resolução da questão

Com base nestes resultados, foram formuladas as seguintes afirmativas.

I. Os mutantes 1, 3 e 7 correspondem aos mutantes na via de transdução de sinal do hormônio.

II. Os mutantes 2, 4, 5 e 6 correspondem aos mutantes na via de biossíntese do hormônio.

III. Os mutantes 1, 3 e 7 correspondem aos mutantes na via de biossíntese do hormônio.

IV. Os mutantes 2, 4, 5 e 6 correspondem aos mutantes na via de transdução de sinal do hormônio.

V. Os mutantes 8, 9 e 10 correspondem a mutantes que produzem níveis elevados do hormônio, mas que não apresentam alteração da sinalização.

Assinale: 


Alternativas
Q566131 Biomedicina - Análises Clínicas
A descoberta do processo de adição de resíduos de ubiquitina às proteínas representou um grande avanço no processo de reconhecimento de modificações pós-traducionais. Com relação a este processo, analise as afirmativas a seguir.

I. A adição de ubiquitina acontece sempre de forma específica, em determinados resíduos da cadeia polipeptídica.

II. A adição de ubiquitina acontece sempre de forma sequencial e rápida, de forma que são gerados sempre intermediários protéicos poli-ubiquitinados.

III. A adição de ubiquitina marca a proteína especificamente para a degradação via proteassoma.

IV. A adição de poli-ubiquitina corresponde a uma das formas de controle do tempo de via das proteínas celulares.

Assinale:  

Alternativas
Q566132 Biomedicina - Análises Clínicas
A síntese de proteínas é um conjunto complexo de reações bioquímicas que garantem a produção de proteínas pela célula, a partir de um molde de RNA produzido a partir do genoma. Com relação à síntese de proteína, assinale a única afirmativa incorreta. 
Alternativas
Q566133 Biomedicina - Análises Clínicas
Encarregado de realizar a purificação de uma proteína de interesse farmacológico, você chegou a um protocolo de purificação que resulta em uma mistura de quatro proteínas, com as seguintes características:

Imagem associada para resolução da questão 

Visando purificar a proteína de interesse farmacológico (Proteína 2), você realizou uma cromatografia de gel filtração. Após acompanhar o perfil de eluição desta cromatografia, você identificou uma sequência de picos, que foram coletados e analisados. Com base nos seus conhecimentos sobre separação de proteínas, assinale a alternativa que melhor corresponde ao i.) número de picos indentificados na análise do cromatograma desta cromatografia; ii.) qual seria o pico que conteria a proteína de interesse; iii) e, no caso de existir a necessidade de passos adicionais em seu protocolo de purificação. Assinale a alternativa que indica uma opção viável de método subsequente a ser utilizado para o isolamento da proteína 2. 


Alternativas
Q566134 Biomedicina - Análises Clínicas
Dentre os diferentes métodos de purificação de proteínas existentes, é correto afirmar que os métodos que se baseiam no peso molecular da proteína em questão para seu isolamento são:
Alternativas
Q566135 Biomedicina - Análises Clínicas
Interessado na purificação de uma proteína recém identificada em uma nova bactéria isolada de corais (proteína PX315), você foi encarregado de estabelecer um protocolo inicial de purificação da mesma, a partir de culturas in vitro estabelecidas em laboratório. A proteína PX315 apresenta peso molecular de cerca de 20kDa, um ponto isoelétrico de 8,1, e tem capacidade de interação com RNAs. Tendo em vista seus conhecimentos sobre os métodos de purificação de proteínas e os dados disponíveis para a proteína em questão, é correto afirmar que, a ordem dos passos sequenciais mais indicados para a purificação da mesma é:
Alternativas
Q566136 Biomedicina - Análises Clínicas
Encarregado de estabelecer um protocolo de purificação de cinco proteínas diferentes, um pesquisador realizou análises visando determinar algumas características básicas de cada um delas, que pudessem lhe indicar as melhores estratégias de purificação de cada uma delas.

Imagem associada para resolução da questão 

Com base nestes dados o pesquisador optou pela realização dos seguintes passos de purificação: Inicialmente, a mistura foi aplicada em uma coluna de sepharose G50, sendo obtidas, na sequência de eluição, a fração 1 (F1, primeira a ser eluída), e a fração F2. A Fração F2 foi então aplicada em uma coluna de concanavalina. Após a aplicação do tampão de lavagem, foi obtida a fração F3 e, após aplicação do tampão de eluição, obteve-se a fração F4. Submetendo a Fração F3 à uma precipitação em sulfato de amônio, foram então obtidas a fração solúvel (F5) e a fração insolúvel (F6). A aplicação da Fração F1 em uma coluna de Poli-U, seguido da aplicação do tampão de lavagem deu então origem à fração F7 e, após a eluição final, com tampão de eluição, à fração F8.

Com base nas características das proteínas, e nos prodecimentos utilizados pelo pesquisador, assinale a alternativa que melhor identifica as frações nas quais cada uma das proteínas sera isolada de forma purificada. 


Alternativas
Q566137 Biomedicina - Análises Clínicas
Em relação aos métodos de purificação de proteínas, cromatografia de afinidade e cromatografia de troca iônica, assinale a alternativa que lista parâmetros que interferem em ambos os processos.
Alternativas
Q566138 Biomedicina - Análises Clínicas
Após realizar a purificação de uma proteína e a obtenção de uma fração pura desta, um estagiário realizou a quantificação do teor de proteínas presente nesta fração por meio de dois métodos clássicos de dosagem de macromoléculas: o método de Folin e o método de Lowry. Diferente do que o estagiário esperava, os resultados obtidos foram bastante discrepantes entre si, conforme tabela abaixo: 

Imagem associada para resolução da questão


Com base nestes resultados e nos seus conhecimentos sobre os métodos em questão, observe as afirmativas abaixo, e assinale abaixo a alternativa correta.

I. O método de Folin apresentou uma menor quantificação pois avalia a quantidade de proteínas em função da presença de alguns poucos tipos de aminoácidos que, por serem pouco abundantes na proteína em questão, levou a uma baixa detecção da mesma pelo método.

II. O método de Lowry apresenta diversos tipos de interferência, o que pode ter levado a uma super-estimativa do nível de proteínas presente na fração analisada.

III. O método de Folin, na verdade, não é um método apropriado para a detecção de proteínas, uma vez que avalia a quantidade de açúcares e não de aminoácidos.

IV. O método de Lowry quantifica as ligações peptídicas presentes na proteína avaliada e, desta forma, apresenta uma maior sensibilidade do que o método de Folin que apenas avalia a presença dos aminoácidos tirosina e triptofano.

V. O método de Folin apresenta difícil manipulação e grande variabilidade, o que resulta em uma baixa reprodutibilidade e alta taxa de erro, o que provavelmente resultou em uma sub-estimativa da quantidade de proteínas presentes na amostra.

Assinale: 


Alternativas
Q566139 Biomedicina - Análises Clínicas
Métodos químicos como o tratamentos com ácido trifluorometanossulfônico, hidrazinólize, β-eliminação e oxidação por periodados são exemplos de técnicas comumente utilizadas em análises proteômicas que pretender caracterizar proteínas que foram modificadas pós-raducionalmente por:
Alternativas
Q566140 Biomedicina - Análises Clínicas
Com relação ao teste de ELISA, é correto afirmar que:
Alternativas
Q566141 Biomedicina - Análises Clínicas
Com relação aos métodos de coloração de proteínas em gel, assinale a alternativa correta.
Alternativas
Q566142 Biomedicina - Análises Clínicas
Com relação ao sequenciamento de peptídeos acoplado à análise proteômica, assinale a alternativa incorreta,
Alternativas
Respostas
21: A
22: C
23: B
24: C
25: A
26: A
27: B
28: D
29: E
30: C
31: B
32: E
33: A
34: D
35: E
36: C
37: C
38: E
39: C
40: E