O subcultivo da maioria das células aderentes envolve a uti...

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Q568022 Biomedicina - Análises Clínicas
O subcultivo da maioria das células aderentes envolve a utilização da protease tripsina e do sal EDTA. Sobre o motivo da utilização destes reagentes no procedimento de subcultivo celular, analise as afirmativas a seguir.

I. As células aderem à superfície inferior da garrafa de cultivo e umas as outras pelas proteínas que compõe a matriz extracelular. Enquanto a tripsina reconhece e cliva regiões nativas destas proteínas, a função do EDTA é quelar os íons Ca2+, que são requeridos para a ligação célula-célula mediada pelas caderinas. Desta forma, tanto o EDTA quanto a tripsina servirão para promover o destacamento das células do frasco de cultivo e sua separação.

II. As células são cultivadas geralmente na presença de soro que fornece fatores de crescimento necessários para a divisão celular. A fim de realizar o subcultivo é necessário eliminar o soro presente no meio. A tripsina irá clivar as proteínas do soro e o EDTA facilitará a formação de agregados protéicos que serão facilmente removidos ao se descartar este meio, promovendo assim a retirada do soro do meio de cultivo.

III. As células aderem à superfície inferior da garrafa de cultivo e umas as outras através das proteínas que compõe a matriz extracelular. A tripsina reconhece e cliva regiões nativas destas proteínas e a função do EDTA é servir de co-fator para a tripsina aumentando sua atividade. Desta forma, promovendo o destacamento das células do frasco de cultivo e sua separação.

Assinale:
Alternativas

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A resposta correta é a alternativa A, que significa que apenas a afirmativa I está correta. A primeira afirmativa está correta porque as células aderem à superfície inferior da garrafa de cultivo e umas às outras através das proteínas que compõem a matriz extracelular. A tripsina e o EDTA são usados para promover o destacamento e a separação das células. A tripsina cliva as proteínas que permitem que as células aderam umas às outras e à garrafa de cultivo, enquanto o EDTA quelata os íons Ca2+ que são necessários para a ligação célula-célula mediada pelas caderinas. No entanto, as afirmativas II e III estão incorretas. A afirmativa II está errada porque a tripsina não cliva as proteínas do soro e o EDTA não facilita a formação de agregados protéicos para remover o soro. A afirmativa III está errada porque o EDTA não atua como co-fator para aumentar a atividade da tripsina. Portanto, apenas a afirmativa I está correta.

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