O estabelecimento de uma reação de PCR para o diagnóstico m...
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Ano: 2010
Banca:
FGV
Órgão:
FIOCRUZ
Prova:
FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Operação de Laboratório de Nível de Segurança |
Q568035
Biomedicina - Análises Clínicas
O estabelecimento de uma reação de PCR para o
diagnóstico molecular de agentes infecciosos a partir de
amostras biológicas muitas vezes apresenta como maior
dificuldade a amplificação específica do fragmento genômico
do patógeno de interesse. As afirmativas a seguir enumeram
possibilidades para aumentar a especificidade da reação.
I. Aumento da concentração de deoxinucleotídeo na reação de PCR.
II. Aumento da concentração da DNA polimerase na reação de PCR.
III. Realização de reações de PCR aninhadas (PCR-nested), utilizando par de iniciadores mais externos à região de interesse na primeira reação, seguido da utilização de par de iniciadores mais internos.
Assinale:
I. Aumento da concentração de deoxinucleotídeo na reação de PCR.
II. Aumento da concentração da DNA polimerase na reação de PCR.
III. Realização de reações de PCR aninhadas (PCR-nested), utilizando par de iniciadores mais externos à região de interesse na primeira reação, seguido da utilização de par de iniciadores mais internos.
Assinale:
Comentários
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Uma vez que o quesito pediu para "aumentar a especificidade da reação", de cara é possível cancelar os íteis I e II, visto que a DNA Polimerase e os deoxirribonucleotídeos são inespecíficos. Eles podem, talvez, alterar a sensibilidade.
Aumentar a concentração do produto da PCR é diferente de aumentar a especificidade.
A primeira é só pensar numa banda clarinha, em que claramente faltou reagentes na reação.
A segunda diz respeito a produção de um produto de amplificação o mais exclusivo possível de um fragmento de interesse.
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