5' ATG GGG AAC AAG CCC GAG TCG -------------------------- CA...
3' TAC CCC TTG TTC GGG CTC AGC --------------------------- GTG GTG ACC TAT TTT GGC TCT 5'
Para amplificação do fragmento de DNA representado acima, o par de iniciadores correto (senso e anti-senso, respectivamente), está em:
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Gabarito comentado
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Alternativa correta: A
A questão aborda o tema da amplificação de DNA, especificamente a escolha correta de iniciadores (primers) para a técnica de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase). Para resolver essa questão, é essencial compreender como os iniciadores se pareiam com as fitas de DNA molde para iniciar a síntese da nova fita de DNA.
Para amplificação por PCR, precisamos de dois iniciadores: um iniciador senso (que se liga à fita molde 3'→5') e um iniciador anti-senso (que se liga à fita molde 5'→3'). O iniciador senso deve ser complementar ao início da fita 3'→5' e o iniciador anti-senso deve ser complementar ao final da fita 5'→3'.
Justificativa da alternativa A:
Iniciador senso: 5’ ATG GGG AAC AAG CCC GAG TCG 3’
Este iniciador se liga à fita molde 3'→5' no início do fragmento de DNA, complementando a sequência 3’ TAC CCC TTG TTC GGG CTC AGC 5’.
Iniciador anti-senso: 5’ TCT CGG TTT TAT CCA GTG GTG 3’
Este iniciador é complementar ao final da fita 5'→3', que é representada pela sequência 3’ GTG GTG ACC TAT TTT GGC TCT 5’.
Portanto, a alternativa A está correta, pois ambos os iniciadores são adequados para amplificação do fragmento de DNA.
Análise das alternativas incorretas:
Alternativa B:
Iniciador anti-senso: 5’ CAC CAC TGG ATA AAA CCG AGA 3’
Apesar de estar correta, este iniciador é o mesmo que o da alternativa A, mas a questão está no segundo iniciador:
Iniciador senso: 5’ ATG GGG AAC AAG CCC GAG TCG 3’
Este é igual ao da alternativa A, então aparentemente não há erro, mas não basta a idoneidade de um, ambos precisam estar corretos.
Alternativa C:
Iniciador senso: 5’ TAC CCC TTG TTC GGG CTC AGC 3’
Este iniciador é complementar à fita 5'→3', o que não está correto para um iniciador senso.
Alternativa D:
Iniciador senso: 5’ CGA CTC GGG CTT GTT CCC CAT 3’
Este iniciador não corresponde ao início do fragmento de DNA, sendo uma sequência incorreta.
Alternativa E:
Iniciador anti-senso: 5’ GTG GTG ACC TAT TTT GGC TCT 3’
Embora esteja correto, o iniciador senso deve iniciar a síntese na fita molde 3'→5', e o iniciador proposto para senso está incorreto.
Por fim, para amplificação eficiente do DNA, é crucial selecionar iniciadores que se pareiem exatamente com as sequências de interesse, garantindo a especificidade e a eficiência do PCR.
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Comentários
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Olá, colegas.
No DNA temos:
- a fita SENSO (5´ --> 3´): Ela recebe esse nome porque está escrita no sentido da vida, isto é, no sentido que ocorre a replicação (5´ --> 3´). Ela é positiva e não será utilizada para a transcrição de RNA mensageiro. Ela é o DNA codificante, uma vez que guardará os genes responsáveis pela codificação do aminoácido.
- a fita ANTISENSO (3´ --> 5´): Ela está no sentido ´´errado´´, uma vez que está escrita no sentido contrário da vida. Ela é negativa e será utilizada para a transcrição de RNA mensageiro.
Agora, vamos nos ater ao enunciado da questão. O examinador pedido os PRIMERS, ou seja, eles serão o inverso das fitas..
- fita SENSO (5´ --> 3´): terá um primer ANTISENSO (5'TCT CGG TTT TAT CCA GTG GTG3').
- fita ANTISENSO (3´ --> 5´): terá um primer SENSO (5'ATG GGG AAC AAG CCC GAG TCG3').
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