Sobre a técnica de Elisa assinale a alternativa CORRETA:

Alternativa Correta: A

A técnica de ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) é uma ferramenta amplamente utilizada na medicina veterinária laboratorial para a detecção e quantificação de proteínas, incluindo antígenos e anticorpos. Esta técnica se baseia em reações antígeno-anticorpo que são detectáveis através de reações enzimáticas, sendo que as enzimas mais comumente utilizadas são a peroxidase e as fosfatases. A peroxidase, por exemplo, catalisa a reação de desdobramento da água oxigenada (H₂O₂) em H₂O mais O₂. Esta explicação corresponde à alternativa A, que está correta.

Análise das Alternativas Incorretas:

B: A descrição do teste ELISA direto está incorreta. No ELISA direto, o antígeno é ligado à placa, e um anticorpo primário conjugado com uma enzima é adicionado para detectar a presença do antígeno. Não é o anticorpo secundário, como mencionado, e a utilização deste tipo de ELISA não é tão rara, ainda que menos sensível que outras formas como o ELISA indireto ou sanduíche.

C: Nesta alternativa, há um erro na descrição do mecanismo de deteção. No ELISA, a reação que gera cor é devido à ação de uma enzima conjugada a um anticorpo, não a uma proteína conjugada ao antígeno detector. A cor é formada quando a enzima converte um substrato cromogênico incolor em um produto colorido.

D: Esta alternativa descreve incorretamente a configuração do teste ELISA. No ELISA direto, é o antígeno que é fixado à superfície sólida, como uma placa de microtitulação, e não é necessário fixar o anticorpo primeiro. Além disso, o antígeno não está diretamente ligado a um marcador enzimático; isso ocorre no caso do anticorpo no ELISA direto.

O entendimento correto do funcionamento do ELISA é crucial para a interpretação de testes laboratoriais e diagnóstico na medicina veterinária. Essa questão exige um conhecimento básico das diferenças entre os tipos de ELISA e o papel das enzimas e reações químicas envolvidas.

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Teste ELISA: Se baseia em reações antígeno-anticorpo detectáveis através de reações enzimáticas. As enzimas mais comumente utilizadas nestas provas é a peroxidase e fosfatases. A peroxidase catalisa a reação de desdobramento da água oxigenada (H2O2) em H2O mais O2.

Por que estão erradas?

B) Ligada a um articorpo primário e não secundário.

C) A proteina estará conjugada ao anticorpo, e não ao antigeno.

D) É fixado primeiramente o anticorpo na superficie, quando é realizado o Elisa Sanduiche e não no Direto e Indireto e também não é o antigeno que estará conjugado a enzima que irá interagir com substrato.