Sobre a técnica de Reação em Cadeia e Polimerase (PCR) em te...

A alternativa correta é a C: A PCR em tempo real associa a metodologia de PCR a um sistema de detecção e quantificação de fluorescência produzida durante os ciclos de amplificação.

A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) em tempo real é uma técnica avançada empregada em biologia molecular, que permite não apenas amplificar o DNA, mas também monitorar essa amplificação em tempo real através de sinais de fluorescência. Este diferencial possibilita não só a detecção, mas também a quantificação precisa de sequências de DNA, o que é essencial em diversas aplicações laboratoriais, como diagnósticos clínicos e pesquisas biomoleculares.

Vamos agora analisar as alternativas:

A - Técnica de biologia molecular que permite a replicação in vivo do DNA de forma extremamente rápida. Quantidades mínimas de material genético podem ser amplificadas milhões de vezes em poucas horas.

Esta declaração contém um erro crucial. A técnica de PCR ocorre in vitro, ou seja, fora de um organismo vivo, em condições controladas em laboratório. A afirmação correta seria que a PCR permite a replicação in vitro do DNA.

B - A PCR está desenhada de acordo com o princípio natural de replicação do DNA. Este é um processo que ocorre em cinco etapas, que em conjunto se designam como um ciclo e que se repete um número específico de vezes.

A PCR tradicionalmente ocorre em três etapas principais: Denaturação, Anelamento (ou Hibridização) e Extensão. Cada ciclo consiste dessas três fases e é repetido várias vezes para amplificar a quantidade de DNA alvo.

D - Na etapa de denaturação a sequência complementar é hibridizada através da temperatura ideal e na etapa de anelamento ocorre a extensão dos primers, em uma média de 100 pares de base/segundo.

Esta alternativa descreve incorretamente as etapas do PCR. Durante a denaturação, as duas fitas do DNA são separadas pelo aquecimento, enquanto o anelamento é onde os primers se ligam às sequências complementares no DNA alvo. A extensão é a fase onde a DNA polimerase sintetiza a nova cadeia de DNA, a partir dos primers, que ocorre após o anelamento.

Portanto, a alternativa C é a única que descreve corretamente a função essencial da PCR em tempo real, que é a associação da amplificação do DNA a um sistema de detecção de fluorescência durante os ciclos.

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Letra C.

a) Técnica de biologia molecular que permite a replicação in vitro do DNA de forma extremamente rápida. Quantidades mínimas de material genético podem ser amplificadas milhões de vezes em poucas horas.

b) A PCR está desenhada de acordo com o princípio natural de replicação do DNA. Este é um processo que ocorre em três etapas, que em conjunto se designam como um ciclo e que se repete um número específico de vezes. 

d) Na etapa de denaturação a dupla fita é separada em duas cadeias de DNA fita simples e na etapa de anelamento a sequência complementar é hibridizada através da temperatura ideal para os primers. Na extensão, a temperatura ideal para a enzima Taq DNA polimerase, ocorre a extensão dos primers, em uma média de 100 pares de base/segundo.