Pichia pastoris é um fungo ascetomiceto utilizado para prod...

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Ano: 2021 Banca: PR-4 UFRJ Órgão: UFRJ Prova: PR-4 UFRJ - 2021 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular |

Q1879265 Biomedicina - Análises Clínicas

Pichia pastoris é um fungo ascetomiceto utilizado para produção de proteínas heterólogas, como uma alternativa aos sistemas de expressão proteica em procariotos. Por ser um organismo metilotrófico, pode ser crescido utilizando o metanol como sua única fonte de carbono. Nesse contexto, assinale a alternativa correta.

Uma das limitações da expressão de proteínas heterólogas em Pichia pastoris é a incapacidade dessa levedura de realizar modificações pós-traducionais, como formação de pontes de dissulfeto e glicosilações de aminoácidos em geral.

Nessa levedura, a clonagem do gene de interesse ocorre pela integração de um cassete de expressão no genoma da levedura, via recombinação homóloga, podendo ser realizada por uma recombinase da própria levedura.

Ao contrário dos sistemas de expressão heteróloga em bactérias, a produção de proteínas heterólogas em Pichia pastoris pode ser realizada somente em pequena escala, já que o seu meio de cultura apresenta altas concentrações de metanol, que é altamente inflamável.

Devido a sua parede celular espessa, a levedura Pichia pastoris não pode ser transformada pelo método de eletroporação, sendo mais utilizado o método de transformação por choque térmico.

O uso de promotores induzidos por metanol para expressão do gene de interesse em Picchia pastoris não é recomendado, pois a presença de metanol no meio de cultura pode causar produção excessiva da proteína de interesse, levando a uma condição tóxica para a levedura.

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