Os métodos moleculares para o diagnóstico de doenças infecci...

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Q2276964 Biomedicina - Análises Clínicas
Os métodos moleculares para o diagnóstico de doenças infecciosas trouxeram grandes avanços às análises laboratoriais. Dentre as várias técnicas descritas na literatura, destaca-se a reação em cadeia da polimerase (PCR) como uma das mais proeminentes. Considerando os princípios e etapas da PCR, analise as afirmativas a seguir.

I. Dois iniciadores oligonucleotídeos que flanqueiam o DNA-alvo são adicionados em excesso ao DNA-molde que é desnaturado termicamente.
II. O íon magnésio é essencial, pois atua como cofator para a ação da enzima DNA-polimerase.
III. A etapa de desnaturação do DNA ocorre em temperaturas inferiores às da etapa de anelamento dos iniciadores oligonucleotídeos.

A sequência está correta em 
Alternativas

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A questão aborda um dos principais métodos utilizados para diagnóstico de doenças infecciosas, conhecido como PCR (reação em cadeia da polimerase). A alternativa correta é a letra C, que indica que as afirmações I e II estão corretas, enquanto a afirmação III está incorreta. A PCR funciona da seguinte maneira: o DNA é primeiro desnaturado termicamente, ou seja, é aquecido para que as suas duas cadeias se separem (afirmação I). Adicionam-se então iniciadores oligonucleotídeos em excesso, que irão se ligar ao DNA nas regiões que flanqueiam a sequência de interesse. O íon magnésio atua como cofator para a enzima DNA-polimerase, que é responsável por "ler" a sequência de DNA e sintetizar uma nova cadeia a partir dela (afirmação II). A afirmação III está incorreta porque a etapa de desnaturação ocorre a temperaturas superiores às da etapa de anelamento dos iniciadores oligonucleotídeos, e não inferiores, já que é necessário calor para "desfazer" as ligações entre as duas cadeias de DNA.

a desnaturação acontece em temperaturas superiores do anelamento

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