O ensaio de ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay, em ing...

Vamos analisar a questão sobre o ensaio de ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay), que é uma técnica fundamental em imunologia para detectar e quantificar moléculas de interesse. A alternativa correta é a Alternativa D.

A Alternativa D está correta porque descreve de forma precisa um dos procedimentos básicos do ELISA: uma quantidade desconhecida de antígeno, sendo ele imobilizado na superfície de uma placa de microtitulação, e submetida a uma incubação com um anticorpo específico, que pode estar conjugado ou não a um cromóforo repórter. Esse processo é a essência do método, pois permite a detecção e quantificação do antígeno com base na ligação específica ao anticorpo.

Agora, vamos entender por que as demais alternativas estão incorretas:

Alternativa A: A detecção no ELISA não ocorre diretamente pela conversão de enzima ou cromóforo repórter em um sinal detectável por luz visível. Na verdade, o sinal detectável é gerado pela conversão de um substrato cromogênico pela enzima ligada ao anticorpo, resultando em uma mudança de cor.

Alternativa B: Embora haja métodos de detecção por fluorescência, o enunciado da questão não especifica isso, e o comprimento de onda de 560 nm não é típico para ensaios ELISA convencionais. Além disso, a maioria dos kits ELISA utiliza detecção baseada em cor, não em fluorescência.

Alternativa C: No ELISA tradicional, os repórteres cromogênicos indicam a presença do complexo anticorpo-antígeno, não a ausência de complexação. A coloração indica a presença do antígeno na amostra, sinalizando a ligação do anticorpo ao antígeno.

Alternativa E: A sensibilidade do ELISA direto depende do número de moléculas de anticorpo primário que se ligam ao antígeno. Uma maior quantidade de anticorpos ligados geralmente resulta em um sinal mais forte e, portanto, maior sensibilidade do ensaio.

Espero que esta explicação tenha ajudado a entender melhor como funciona o ensaio de ELISA e a importância de cada componente no processo. Se tiver mais dúvidas, estou à disposição para ajudar!

"o ensaio sanduíche (o mais comum da técnica ELISA) usa dois anticorpos reativos diferentes com epitopos diferentes no antígeno cuja concentração deve ser determinada. Uma quatidade fixa de anticorpo é ligada a uma série de suportes sólidos replicados, como tiras plátiscas de microtitulação. Soluções de amostra contendo antígeno a uma concentração desconhecida ou uma série de soluções padrão com concentrações de antígeno conhecidas são acrescentadas às tiras e deixadas para que a ligação ocorra (...)"

Fonte: Imunologia celular e molecular - Abbas

B) Detecção por fluorescência é Imunofluorescência Indireta

E) As funções dos anticorpos são dependentes de sua habilidade em se ligar especificamente a antígenos. Devido a esta ligação específica de antígeno-anticorpo, tem-se a precisão do teste ELISA.