O processo de transformação constitui um evento de alta importância na técnica de manipulação gênica. A transformação natural descrita por Griffith, em 1928, e por Avery e colaboradores, em 1944, é um evento raro. No entanto, em 1970, Mandel e Higa encontraram que E. coli tornou-se marcadamente competente para transformação com DNA exógeno, quando a bactéria foi suspensa em cloreto de cálcio gelado e submetida a um curto choque térmico a 42 ºC. Com base neste texto, analise as afirmativas a seguir.

I. Estes mesmos autores também verificaram que as bactérias crescidas até a fase log eram mais competentes do que aquelas isoladas de outros estágios do crescimento.

II. Para uma boa eficiência de transformação, o procedimento do cloreto de cálcio, usado até hoje, produz uma eficiência que varia de 101 a 103 transformantes por micrograma de DNA intacto.

III. O tamanho e a conformação da molécula do DNA afetam o processo de transformação e o DNA linear é mais facilmente incorporado pela célula bacteriana competente.

Assinale:

Question

O processo de transformação constitui um evento de alta importância na técnica de manipulação gênica. A transformação natural descrita por Griffith, em 1928, e por Avery e colaboradores, em 1944, é um evento raro. No entanto, em 1970, Mandel e Higa encontraram que E. coli tornou-se marcadamente competente para transformação com DNA exógeno, quando a bactéria foi suspensa em cloreto de cálcio gelado e submetida a um curto choque térmico a 42 ºC. Com base neste texto, analise as afirmativas a seguir.

I. Estes mesmos autores também verificaram que as bactérias crescidas até a fase log eram mais competentes do que aquelas isoladas de outros estágios do crescimento.

II. Para uma boa eficiência de transformação, o procedimento do cloreto de cálcio, usado até hoje, produz uma eficiência que varia de 101 a 103 transformantes por micrograma de DNA intacto.

III. O tamanho e a conformação da molécula do DNA afetam o processo de transformação e o DNA linear é mais facilmente incorporado pela célula bacteriana competente.

Assinale: Alternativa A: se apenas a afirmativa I estiver correta. Ou Alternativa B: se apenas as afirmativas I e II estiverem corretas. Ou Alternativa C: se apenas as afirmativa II estiver correta. Ou Alternativa D: se apenas as afirmativa III estiver correta. Ou Alternativa E: se apenas as afirmativa I e III estiverem corretas.

Qconcursos · Accepted Answer

Alternativa [A] se apenas a afirmativa I estiver correta. A alternativa correta é a A.

Vamos entender por que essa é a resposta certa e analisar as outras afirmativas:

Afirmativa I: "Estes mesmos autores também verificaram que as bactérias crescidas até a fase log eram mais competentes do que aquelas isoladas de outros estágios do crescimento."

Esta afirmativa está correta. A fase logarítmica (ou fase exponencial) é a fase do crescimento bacteriano onde as células estão mais ativamente se dividindo e, portanto, são mais metabolicamente ativas. Nesse estágio, as bactérias se tornam mais competentes para a transformação, que é a capacidade de absorver DNA exógeno do ambiente.

Afirmativa II: "Para uma boa eficiência de transformação, o procedimento do cloreto de cálcio, usado até hoje, produz uma eficiência que varia de 101 a 103 transformantes por micrograma de DNA intacto."

Esta afirmativa está incorreta. A eficiência de transformação usando cloreto de cálcio em E. coli é tipicamente muito maior, geralmente na faixa de 105 a 108 transformantes por micrograma de DNA. Portanto, os valores mencionados (101 a 103) são muito baixos.

Afirmativa III: "O tamanho e a conformação da molécula do DNA afetam o processo de transformação e o DNA linear é mais facilmente incorporado pela célula bacteriana competente."

Esta afirmativa está incorreta. Na verdade, o DNA plasmidial (circular) é mais eficientemente incorporado por bactérias competentes do que o DNA linear. O DNA linear tende a ser degradado mais rapidamente dentro da célula bacteriana, enquanto o DNA plasmidial é mais estável e mais facilmente replicado.

Assim, ao analisar cada afirmativa, fica claro que a única afirmativa correta é a I, o que faz da alternativa A a resposta correta.

Espero que esta explicação tenha ajudado a esclarecer suas dúvidas sobre o tema da questão e os métodos de transformação em E. coli. Se precisar de mais alguma coisa, estou à disposição!

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