Em relação à reação de PCR, analise as afirmativas a seguir ...
( ) As etapas fundamentais de uma reação de PCR são a desnaturação térmica do DNA molde, o anelamento do oligonucleotídeo iniciador às fitas moldes e a extensão ou polimerização das novas fitas de DNA que utilizam os dNTPs como substrato da reação de polimerização. ( ) O magnésio é um cofator da enzima DNA polimerase, sendo sua concentração fundamental para a correta realização da reação de PCR. O ajuste incorreto da quantidade deste íon pode gerar artefatos na reação, uma vez que concentrações baixas de Mg podem impedir a desnaturação completa do molde de DNA, além de diminuir a especificidade da reação; já concentrações altas de Mg não permitem a realização da reação. ( ) A concentração de dNTPs (dATP, dCTP, dGDP e dTTP) deve ser calculada de modo que dCTP e dGDP tenham o dobro da concentração dos demais desoxirribonucleotídeos.
As afirmativas são, na ordem apresentada, respectivamente,
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A polimerase termostável requer a presença de magnésio para agir como um cofator durante o processo da reação. Seu papel é similar ao de um catalizador, no qual o magnésio não é exatamente consumido na reação.
- O excesso desse íon torna a reação mais rápida. Entretanto, não é necessariamente uma coisa boa. Se muito magnésio estiver presente, a DNA polimerase vai funcionar tão rapidamente que cometerá muitos erros no processo de cópia.
- Na escassez, a reação de PCR não vai acontecer tão rápido quanto deveria, se funcionar. Se não há magnésio suficiente, uma parte da DNA polimerase não vai ser ativada e não vai funcionar. Logo, o experimento como um todo pode ser arruinado.
Não sei se o pensamento está correto, se alguém puder esclarecer..
A última assertiva, usa-se mais A e T do que C e G por conta das ligações de hidrogênio mais fracas da A e T do que as ligações triplas da C e G.. é isso??
Gabarito letra C
V
F: Concentrações altas de Mg geralmente aumentam a atividade da polimerase e podem diminuir a especificidade, mas não impedem a realização da reação. Concentrações baixas de Mg podem diminuir a eficiência da reação, mas não afetam a desnaturação do DNA.
Falso: A concentração de todos os dNTPs (dATP, dCTP, dGTP e dTTP) deve ser igual para garantir uma síntese equilibrada e eficiente do DNA durante a PCR.
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