Sobre a análise da eritropoietina e análogos em urina, por ...

Olá, aluno! Vamos analisar a questão sobre a análise da eritropoietina em urina por focalização isoelétrica e discutir a alternativa correta, bem como as incorretas.

A alternativa C é a correta: "nas etapas de pré-concentração da amostra, focalização isoelétrica, dupla imunotransferência e quimioluminescência".

Vamos entender o porquê:

A eritropoietina (EPO) é um hormônio crucial na produção de glóbulos vermelhos. A análise da EPO e seus análogos em urina é complexa e requer várias etapas para garantir a precisão.

1. Pré-concentração da amostra: Esta etapa é fundamental para aumentar a concentração da EPO na amostra de urina, tornando-a mais detectável nas etapas subsequentes.

2. Focalização isoelétrica: Esta técnica separa proteínas com base em seu ponto isoelétrico, que é o pH no qual a proteína não possui carga líquida. É essencial para distinguir diferentes formas de EPO.

3. Dupla imunotransferência: Também conhecida como Western-Blot, esta etapa envolve a transferência de proteínas para uma membrana e a detecção com anticorpos específicos. Na dupla imunotransferência, são realizados dois passos de transferência para garantir especificidade e sensibilidade.

4. Quimioluminescência: Esta técnica é usada para revelar a presença da EPO na membrana. A reação produz luz, que é medida e correlacionada à quantidade de EPO.

Agora, vejamos as alternativas incorretas:

A - Purificação por cromatografia de afinidade, focalização isoelétrica, Western-Blot e revelação colorimétrica: A purificação por cromatografia de afinidade não é normalmente utilizada na análise de EPO em urina para esta finalidade específica.

B - Cromatofocalização, dupla imunotransferência e revelação colorimétrica: A cromatofocalização combina princípios de cromatografia e focalização isoelétrica, mas não é o método mais comum para análise de EPO em urina.

D - Focalização isoelétrica, onde diferentes eritropoietinas são separadas por volume molecular, Western-Blot e quimioluminescência: A focalização isoelétrica separa proteínas pelo ponto isoelétrico, não pelo volume molecular.

E - Ultrafiltração, focalização isoelétrica, Western-Blot e revelação colorimétrica: A ultrafiltração é uma técnica de separação com base em tamanho, mas não é essencial neste contexto específico.

Espero que esta explicação tenha elucidado a análise da EPO e as razões pelas quais a alternativa C é correta. Qualquer dúvida, estou à disposição!

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