No preparo de lâminas para as aulas de histologia, frequentemente utilizam-se blocos de tecido animal
parafinados que são cortados em micrótomo que gera sessões que serão fixadas e coradas, em lâmina,
para a análise microscópica. Para que o tecido animal fique apto a passar por esse processo, é
necessária uma fase de clarificação que impregna o tecido com

Question

No preparo de lâminas para as aulas de histologia, frequentemente utilizam-se blocos de tecido animal
parafinados que são cortados em micrótomo que gera sessões que serão fixadas e coradas, em lâmina,
para a análise microscópica. Para que o tecido animal fique apto a passar por esse processo, é
necessária uma fase de clarificação que impregna o tecido com  Alternativa A: acetona, que, em seguida, é retirada por imersão em água destilada em banho-maria a 37oC por 12 horas.  Ou Alternativa B: solução alcalina tamponada, que neutraliza o pH do tecido e o deixa pronto para receber a coloração.  Ou Alternativa C: metanol absoluto, que posteriormente é eliminado com a imersão do bloco de tecido em água destilada em banho de gelo por 30 minutos.  Ou Alternativa D: xilol, que, posteriormente, será substituído pela parafina aquecida em torno de 58oC. Ou Alternativa E: bálsamo do Canadá, que permite a fixação do fragmento de tecido na lâmina de microscopia para posterior coloração.

Qconcursos · Accepted Answer

Alternativa [D] xilol, que, posteriormente, será substituído pela parafina aquecida em torno de 58oC. A
questão cita o preparo de lâminas para histologia, que passa por determinadas etapas
e necessita de uma fase de clarificação para que esteja apto para a análise.
Pede-se a alternativa que indique o componente utilizado na impregnação do
tecido nessa fase. Para a correta observação de amostras em
microscópio, é necessária uma preparação que segue uma sequência de etapas: a
coleta da amostra, com a remoção de tecido em vida ou durante necropsia; a
fixação, que interrompe o processo metabólico celular e preserva os tecidos
para posterior incorporação de substâncias (principais agentes fixadores:
formalina, álcool etílico, ácido acético, ácido pícrico, glutaraldeído);
desidratação, que remove toda a água das células ou tecidos gradativamente; clarificação
(ou diafanização), que remove o álcool incluindo o xilol ou toluol em
substituição, o que torna a amostra transparente; inclusão, colocando-se a
amostra em meio sólido para posteriores cortes finos (ex. parafina, lâminas de
vidro, resina, agarose, agar); corte em finas seções, que podem ser realizados
com bisturi ou micrótomo em seção transversal, longitudinal, tangencial ou um
corte em micrótomo ultrafino; coloração, para destacar diferentes estruturas da
amostra (ex. Hematoxilina “núcleo" e eosina “citoplasma" – tecidos);
montagem da lâmina colocando-se a lamínula, um pedaço de vidro, sobre a seção
cortada e corada para observação microscópica. (Histotécnica. Disponível
em https://atlashistoembrio.uneb.br/histotecnica/. Acesso em
setembro de 2023)

 Fonte da imagem: site epsjv.fiocruz.br

Para que o tecido animal fique apto a
passar por esse processo, é necessária uma fase de clarificação que
impregna o tecido com:

A) acetona, que, em seguida, é retirada por imersão em água destilada
em banho-maria a 37oC por 12 horas. Incorreta.
A acetona é utilizada na etapa de fixação histológica para preservar o tecido.

B) solução alcalina tamponada, que neutraliza o pH do tecido e o deixa
pronto para receber a coloração. Incorreta.
Soluções alcalinas são usadas para descalcificação química, não para clarificação
de tecidos.


C) metanol absoluto, que posteriormente é eliminado com a imersão do bloco
de tecido em água destilada em banho de gelo por 30 minutos. Incorreta. O metanol é um agente desnaturante utilizado
na etapa de fixação histológica para preservação do tecido.


D) xilol, que, posteriormente, será substituído pela parafina aquecida em
torno de 58oC. CORRETA. O
xilol é miscível em etanol, o que permite sua utilização na etapa de clarificação
para substituir o álcool, e posteriormente ser substituído pela parafina
aquecida na fase de inclusão. 


E) bálsamo do Canadá, que permite a fixação do fragmento de tecido na lâmina
de microscopia para posterior coloração. Incorreta.
O bálsamo do Canadá é utilizado como meio de selagem permanente, na montagem da
lâmina.

 

Gabarito do
Professor: D

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