O principal problema na extração de RNA é a presença da
enzima RNAse, responsável pela degradação do RNA. Esta
enzima, na maioria das vezes, é derivada do próprio tecido
de onde se objetiva a extração de RNA, mas também pode
ser resultado de uma contaminação externa.
Selecione a alternativa que descreve uma forma ineficaz de
proteção do RNA da ação das RNAses durante a extração.

Question

O principal problema na extração de RNA é a presença da
enzima RNAse, responsável pela degradação do RNA. Esta
enzima, na maioria das vezes, é derivada do próprio tecido
de onde se objetiva a extração de RNA, mas também pode
ser resultado de uma contaminação externa.
Selecione a alternativa que descreve uma forma ineficaz de
proteção do RNA da ação das RNAses durante a extração.  Alternativa A: Utilizar proteínas que podem ser obtidas de empresas de
biologia molecular que impedem a ação das RNAse por
inibir a função catalítica destas enzimas. Ou Alternativa B: Aquecer as amostras biológicas antes da extração por 10
minutos a 80°C. Ou Alternativa C: Utilizar dietil pirocarbonato (diethyl pyrocarbonate – DEPC)
nas soluções preparadas para a extração de RNA. Ou Alternativa D: Expor a vidraria a ser utilizada durante a extração a
temperaturas de 200°C por três a quatro horas. Ou Alternativa E: Trabalhar sempre com luvas, durante a manipulação das
amostras.

Drauzio Jr · Accepted Answer

Alternativa [B] Aquecer as amostras biológicas antes da extração por 10
minutos a 80°C. A alternativa que descreve uma forma ineficaz de proteção do RNA da ação das RNAses durante a extração é a opção A, que sugere o uso de proteínas que inibem a ação das RNAses por inibir sua função catalítica. Isso porque, na realidade, a maioria das proteínas que inibem as RNAses não são eficazes em condições de extração de RNA e podem até mesmo prejudicar a qualidade do RNA extraído. As opções B e C são válidas e eficazes, pois o aquecimento das amostras biológicas pode inativar as RNAses e o DEPC pode degradar as enzimas. A alternativa D é impraticável e desnecessária, enquanto a opção E é importante para evitar contaminações, mas não é uma forma direta de proteger o RNA da ação das RNAses.

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