A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é realizada por meio...

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Q2300926 Técnicas em Laboratório
A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é realizada por meio de ciclos de variação de temperatura, em que cada ponto do ciclo ocorre uma reação específica. Na temperatura de 50 a 58 ºC e na de cerca de 72 ºC ocorrem, respectivamente:  
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A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é uma técnica molecular amplamente utilizada para amplificar segmentos específicos de DNA. A PCR é realizada em uma série de etapas, geralmente envolvendo ciclos repetidos de aquecimento e resfriamento. Aqui estão as principais etapas da PCR:

  1. Desnaturação (Denaturation):
  • Temperatura: Cerca de 94-98°C.
  • Duração: 20 segundos a 1 minuto ou até 5 minutos.
  • O DNA alvo é aquecido para que as duas cadeias de DNA se separem, resultando na desnaturação das duplas hélices.
  1. Anelamento (Annealing):
  • Temperatura: Geralmente entre 50-65°C.
  • Duração: 20 segundos a 1 minuto.
  • Os primers (oligonucleotídeos curtos complementares às regiões flanqueadoras do DNA alvo) se ligam às sequências alvo específicas.
  1. Extensão (Extension):
  • Temperatura: Cerca de 72°C.
  • Duração: Geralmente 1 minuto por cada 1.000 pares de bases.
  • A DNA polimerase sintetiza uma nova cadeia de DNA complementar à sequência alvo usando os nucleotídeos disponíveis.

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