A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é realizada por meio...
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A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é uma técnica molecular amplamente utilizada para amplificar segmentos específicos de DNA. A PCR é realizada em uma série de etapas, geralmente envolvendo ciclos repetidos de aquecimento e resfriamento. Aqui estão as principais etapas da PCR:
- Desnaturação (Denaturation):
- Temperatura: Cerca de 94-98°C.
- Duração: 20 segundos a 1 minuto ou até 5 minutos.
- O DNA alvo é aquecido para que as duas cadeias de DNA se separem, resultando na desnaturação das duplas hélices.
- Anelamento (Annealing):
- Temperatura: Geralmente entre 50-65°C.
- Duração: 20 segundos a 1 minuto.
- Os primers (oligonucleotídeos curtos complementares às regiões flanqueadoras do DNA alvo) se ligam às sequências alvo específicas.
- Extensão (Extension):
- Temperatura: Cerca de 72°C.
- Duração: Geralmente 1 minuto por cada 1.000 pares de bases.
- A DNA polimerase sintetiza uma nova cadeia de DNA complementar à sequência alvo usando os nucleotídeos disponíveis.
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