No momento do repique de um cultivo celular, as células ader...

Tema central da questão: A questão aborda o processo de repique de cultivo celular, especificamente a liberação de células aderidas à parede da garrafa de cultura. Isso é crucial no manejo de culturas celulares em laboratório, onde se busca manter a viabilidade e a integridade das células para estudos experimentais e diagnósticos.

Resumo teórico: Durante o cultivo celular, as células podem se aderir ao substrato em que estão crescendo. Para a subcultura (repique), é necessário desprendê-las sem danificá-las. A tripisina é uma enzima proteolítica que quebra as proteínas que mantêm as células aderidas, permitindo que elas sejam transferidas para novos recipientes. Essa técnica é fundamental para expandir e manter culturas celulares em laboratório.

Justificativa da alternativa correta (D - tripsina): A tripsina é a escolha padrão para a dissociação de células aderentes em cultura. Ela atua clivando as proteínas de adesão celular, como as integrinas, sem causar danos significativos às células, permitindo que elas sejam recolocadas em novas culturas. Isso garante a continuidade dos experimentos e a saúde das células.

Análise das alternativas incorretas:

• A - colagenase tipo IV: Embora a colagenase seja usada para dissociar tecidos, não é ideal para células já em cultura porque é específica para colágeno e pode não ser eficaz na liberação de células aderidas em plástico ou vidro.
• B - colagenase tipo II: Similar à colagenase tipo IV, é usada para tecidos ricos em colágeno e não é a escolha adequada para a maioria das culturas celulares de adesão.
• C - lipase: Enzima que hidrolisa lipídios, sem utilidade na dissociação de células aderidas que requerem a quebra de proteínas de adesão.
• E - pepsina: Uma enzima digestiva que quebra proteínas em meio ácido, mas seu uso em cultura celular é inadequado devido ao potencial de danificar as células.

Estrategia de interpretação: Na interpretação de questões sobre técnicas laboratoriais, é importante reconhecer as enzimas ou reagentes específicos que têm uma função claramente definida no protocolo padrão. Assim, ao se deparar com uma questão sobre dissociação de células, a experiência prática e a teoria indicam a tripsina como a resposta correta.

Gostou do comentário? Deixe sua avaliação aqui embaixo!

Gabarito: letra D.

• Tripsina 1:250 – 0,05% – 1X

• É uma solução balanceada com tripsina de origem suína isenta dos íons Cálcio e Magnésio, pronta para uso, diluída na concentração de uso direto. Em sua composição o EDTA atua como agente quelante.

• Permite o “descolamento” das células de frascos de cultivo e/ou desagregando células entre si através de sua propriedade proteolítica sobre proteínas intercelulares, e ainda alterando a estabilidade das membranas ao quelar o íon cálcio.

Fonte: https://www.prolab.com.br/produtos/biologia-molecular/cultura-celular-suplementos/tripsina-005-1x-100ml/#:~:text=Permite%20o%20%E2%80%9Cdescolamento%E2%80%9D%20das%20c%C3%A9lulas,ao%20quelar%20o%20%C3%ADon%20c%C3%A1lcio.