É de conhecimento mundial que o desafio central da moderna b...
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Olá, aluno! Vamos entender juntos a questão sobre a hibridização in situ e identificar a alternativa correta.
Alternativa correta: B - As sondas utilizadas correspondem a segmentos de ácido nucleico no qual são incorporados nucleotídeos modificados.
A hibridização in situ (HIS) é uma técnica de localização de sequências específicas de DNA ou RNA em cortes de tecidos, células ou cromossomos. Essa técnica permite visualizar a distribuição e a localização de ácidos nucleicos específicos diretamente dentro de uma amostra biológica, sem a necessidade de extração do DNA ou RNA. Vamos agora analisar cada alternativa para entender por que a alternativa B é a correta e as outras estão incorretas.
Alternativa A: "O DNA é retirado de uma amostra tecidual, e passa por uma reação de PCR para incorporação de nucleotídeos marcados. O resultado pode ser visto fixando-se o material em lâmina e analisando-o em microscópio de fluorescência."
Essa afirmação está incorreta porque na hibridização in situ, o DNA ou RNA não é retirado da amostra. Na verdade, a amostra é mantida integral e as sondas de ácido nucleico marcadas são hibridizadas diretamente no tecido ou célula.
Alternativa B: "As sondas utilizadas correspondem a segmentos de ácido nucleico no qual são incorporados nucleotídeos modificados."
Essa afirmação está correta. Na HIS, as sondas são segmentos de DNA ou RNA que são complementares à sequência alvo na amostra. Essas sondas contêm nucleotídeos modificados, que podem ser marcadores fluorescentes ou radioativos, permitindo a detecção visual da hibridização.
Alternativa C: "Os nucleotídeos marcados sempre apresentam um isótopo radioativo."
Essa afirmação está incorreta. Embora nucleotídeos radioativos possam ser usados, não é obrigatório. Muitas vezes, marcadores fluorescentes ou enzimáticos são usados em vez de isótopos radioativos devido à segurança, facilidade de uso e clareza na visualização.
Alternativa D: "A hibridização in situ só pode ser aplicada em preparações com cromossomos metafásicos."
Essa afirmação está incorreta. A HIS pode ser aplicada em uma variedade de preparações, não apenas em cromossomos metafásicos. Pode ser utilizada em cortes de tecido, células inteiras, e em diferentes estágios do ciclo celular.
Alternativa E: "O resultado do experimento de hibridização in situ deve ser analisado em microscópio com fluorescência, utilizando-se sempre DAPI como contracorante."
Essa afirmação está incorreta. Embora o microscópio de fluorescência seja frequentemente usado, não é obrigatório e outras técnicas de visualização podem ser usadas. Além disso, o DAPI é um contracorante comum, mas não é obrigatório para todos os experimentos de HIS.
Espero que essa explicação tenha ajudado a entender melhor o conceito de hibridização in situ e a razão pela qual a alternativa B é a correta. Qualquer dúvida, estou aqui para ajudar!
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GAB.: B
A hibridização in situ (HIS) detecta sequências específicas de DNA ou RNA utilizando-se sequência complementar de ácidos nucleicos (sonda) marcados radioativa ou quimicamente.
Gabarito B.
Em genética, o termo sonda (também sonda de hibridização) refere-se ao DNA de cadeia simples, marcado com um radioisótopo (por exemplo o, 32P) ou biotina.
A principal função das sondas é identificar, entre um conjunto de moléculas de ácidos nucleicos, a chamada sequência-alvo. É eleita como sonda uma molécula que possua sequência o mais complementar possível em relação à sequência-alvo.
Hibridização in situ(do inglês: "In situhybridization" (ISH) é um tipo de hibridização que usa DNA, RNA ou trechos de ácidos nucleicos modificados (i.é., sonda) marcadores complementares para localizar uma sequência específicas de DNA ou RNA de uma parte ou trecho de tecido (in situ).
Não consegui localizar o edital desse concurso......alguém pode ajudar?
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