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É utilizada para classificar bactérias com base no tamanho, morfologia celular e comportamento diante de corantes.

As interpretações dos esfregaços corados pelo Gram envolvem considerações relacionadas com as características da coloração, tamanho, forma e agrupamento das células.

Pode ser utilizada na bacterioscopia da maioria dos materiais biológicos ou culturas de microrganismos em meios sólidos ou líquidos.

Fornecem melhores resultados, quando aplicada na análise de amostras recém-coletadas ou aquelas provenientes de culturas jovens e cultivadas sem inibidores.

A fixação do esfregaço deve ser feita com o uso de temperaturas acima de 90ºC, a seco, e a coloração deve ser feita antes que a lâmina esfrie.