Bownds e colaboradores (1996) realizaram um dos estudos pio...
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Ano: 2010
Banca:
FGV
Órgão:
FIOCRUZ
Prova:
FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Micobactérias |
Q568572
Biomedicina - Análises Clínicas
Bownds e colaboradores (1996) realizaram um dos estudos
pioneiros sobre o uso da citometria de fluxo em testes de
susceptibilidade a antimicrobianos. Tais pesquisadores
usaram a cepa Mycobacterium fortuitum ATCC 14467 e o
corante diacetato de fluoresceína (FDA) nos ensaios com
antimicrobianos para determinar a concentração mínima
inibitória. Na primeira parte do ensaio, os autores avaliaram o
padrão de interação do corante com a cepa micobacteriana
(viável ou inativada pelo calor) e com o meio de cultura, o
qual poderia levar à interpretação errônea dos resultados
quanto à fluorescência. Após a incubação, um volume de
10ml de FDA (10 mg/ml; Sigma) foi adicionado às soluções
de meio de cultura com células cultivadas por sete dias a
37°C de M. fortuitum ou ao controle negativo de forma a obter
uma concentração final de 100 ng/ml.
As suspensões foram incubadas a 37°C por 30 min e analisadas a 488nm com FACScam flow cytometer (Becton Dickinson Immunocytometry Systems) utilizando FAC Scan Lysys II software para a acquisição de dados e análise. Os gráficos resultantes estão na figura abaixo.
Legenda da Figura: Os números nos eixos y e x de cada painel são 100 , 101 , 102 , 103 e 104 , respectivamente.
Usando seus conhecimentos de citometria de fluxo e micobacteriologia laboratorial, assinale a alternativa correta.
As suspensões foram incubadas a 37°C por 30 min e analisadas a 488nm com FACScam flow cytometer (Becton Dickinson Immunocytometry Systems) utilizando FAC Scan Lysys II software para a acquisição de dados e análise. Os gráficos resultantes estão na figura abaixo.
Legenda da Figura: Os números nos eixos y e x de cada painel são 100 , 101 , 102 , 103 e 104 , respectivamente.
Usando seus conhecimentos de citometria de fluxo e micobacteriologia laboratorial, assinale a alternativa correta.
Comentários
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A alternativa correta é a B, que se refere ao crescimento de M. fortuitum em meio de cultura 7H9 na ausência de FDA. Isso é indicado pela ausência de fluorescência nos gráficos. Na figura apresentada, cada painel corresponde a uma condição experimental diferente, combinando a presença ou ausência de FDA e a viabilidade da célula. No quadro B, observa-se um padrão de fluorescência baixo e homogêneo, indicando ausência de interação com o corante FDA, o que indica que a cepa de M. fortuitum está crescendo no meio de cultura sem a adição do corante. A utilização da citometria de fluxo em testes de susceptibilidade a antimicrobianos pode permitir avaliar o crescimento bacteriano em condições distintas, contribuindo para um melhor entendimento de mecanismos de resistência e para o desenvolvimento de novos antibióticos.
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