Os iniciadores (primers), usados para amplificar por ...
Assinale a alternativa que indique o sítio da região polimórfica na qual os primers deverão se anelar.
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Alternativa correta: C - Nas sequências que flanqueiam o microssatélite polimórfico.
Vamos entender melhor a questão e os conceitos abordados.
Os microssatélites, também conhecidos como Short Tandem Repeats (STRs), são regiões do DNA constituídas por sequências curtas de nucleotídeos que se repetem diversas vezes. Essas regiões são altamente polimórficas, ou seja, variam muito entre os indivíduos, o que as torna particularmente úteis na genética forense para a identificação de pessoas.
A técnica de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) é utilizada para amplificar essas regiões específicas do DNA. Para que a amplificação ocorra, são necessários iniciadores, ou primers, que são pequenas sequências de DNA que se anelam (hibridam-se) a regiões específicas do DNA que se deseja amplificar.
Os primers precisam se ligar a regiões que flanqueiam (ou seja, que estão imediatamente adjacentes a) a sequência de microssatélite, para que a enzima DNA polimerase possa iniciar a síntese do novo DNA. Isso ocorre porque a DNA polimerase somente pode adicionar nucleotídeos a uma cadeia de DNA existente a partir de uma extremidade 3'-OH livre, que é fornecida pelo primer.
Portanto, a alternativa C está correta, pois os primers devem se anelar nas sequências que flanqueiam o microssatélite polimórfico.
Vamos explicar agora porque as outras alternativas estão incorretas:
A - Qualquer uma das unidades repetitivas do microssatélite: Esta alternativa está errada porque os primers não se ligam às unidades repetitivas do microssatélite, mas sim às regiões flanqueadoras. As unidades repetitivas são muito variáveis e não têm a sequência necessária para a hibridação específica dos primers.
B - Na região central do microssatélite polimórfico: Errado porque os primers precisam se anelar nas regiões adjacentes ao microssatélite para que a amplificação da sequência completa ocorra. A região central é onde está a maior variabilidade, tornando difícil a anelagem específica dos primers.
D - Na região intrônica das sequências polimórficas: Embora introns possam conter microssatélites, os primers ainda precisam se anelar nas regiões flanqueadoras específicas de qualquer região de interesse, não necessariamente nos introns.
E - Na região promotora do microssatélite polimórfico: A região promotora está associada à regulação da transcrição de genes e geralmente não está relacionada diretamente com os microssatélites. Para amplificação por PCR, os primers devem ser desenhados para as regiões que flanqueiam o microssatélite.
Espero que esta explicação tenha esclarecido o raciocínio necessário para resolver essa questão. Se precisar de mais detalhes ou tiver outras dúvidas, estarei à disposição para ajudar!
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Comentários
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· Os STRs podem ser detectados por PCR: os pares de primers são usados para FLANQUEAR as regiões de microssatélites.
O polimorfismo de um loco microssatélite pode ser constatado por meio de PCR, utilizando-se um par de primers específicos e complementares à sequencias únicas que flanqueiam o loco.
http://www.locus.ufv.br/bitstream/handle/123456789/8784/texto%20completo.pdf?sequence=1
GABARITO LETRA C!
Os primes sempre vão se ligar na extremidade 3'.
E Sempre no sentido 5' -> 3'.
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