A extração de ácidos nucleicos é uma etapa de grande import...

Alternativa correta: D - 3, 4 e 5, apenas.

A questão em questão aborda o tema da extração de ácidos nucleicos, uma técnica fundamental na biologia molecular que permite a obtenção de DNA ou RNA a partir de células para uso em diversas aplicações, como a reação de amplificação in vitro ou a hibridização. Para resolver essa questão, é essencial o conhecimento sobre os processos de lise celular, purificação de ácidos nucleicos e métodos de avaliação da pureza do material extraído.

A afirmativa 1 está incorreta porque menciona a necessidade de clivagem da espessa camada de peptideoglicana na parede celular de bactérias Gram negativas usando a enzima lisozima. No entanto, essa descrição é mais apropriada para bactérias Gram positivas, que possuem uma camada espessa de peptideoglicana. As Gram negativas têm uma camada mais fina de peptideoglicana e uma membrana externa adicional.

A afirmativa 2 está incorreta; a solução de fenol/clorofórmio é comumente usada para a remoção de proteínas durante o processo de extração de ácidos nucleicos, mas não para a remoção específica de RNA.

A afirmativa 3 está correta; o gradiente de cloreto de césio (CsCl) é uma técnica de centrifugação utilizada para separar moléculas com base em sua densidade, podendo ser utilizada para purificar DNA e remover contaminantes como RNA e proteínas.

A afirmativa 4 está correta; a espectrofotometria é um método para avaliar a pureza do DNA medindo a absorbância a 260 nm e 280 nm. A relação A260/A280 fornece uma estimativa da pureza do DNA, indicando a presença de proteínas ou outros contaminantes.

A afirmativa 5 está correta; a lise da bactéria Escherichia coli pode ser realizada pela ação de detergentes aniônicos e substâncias alcalinas que rompem a membrana celular e favorecem a liberação do material genético.

Com base nessas informações, podemos concluir que as afirmativas 3, 4 e 5 estão corretas, fazendo da Alternativa D a resposta correta para a questão.

1 Errada. Lisozima usada para quebrar parede de Gran Positiva.

2 Errada porque o processo de extração exige também alcool.