A técnica de PCR é muito sensível e capaz de gerar milhares...

Gabarito: B

A questão aborda a técnica de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase), uma metodologia amplamente utilizada na biologia molecular para amplificar segmentos específicos de DNA. A técnica é muito sensível e pode gerar milhares de cópias de um segmento de DNA a partir de uma quantidade mínima de amostra.

Alternativa Correta: B

A concentração do magnésio pode afetar diretamente na ação da enzima Taq DNA polimerase.

A Taq DNA polimerase é uma enzima essencial na PCR, responsável pela síntese das novas cadeias de DNA. A concentração de íons magnésio (Mg²⁺) é crucial porque esses íons são cofatores que influenciam a atividade da polimerase. Uma concentração inadequada de Mg²⁺ pode resultar em uma amplificação ineficiente ou inespecífica do DNA.

Alternativas Incorretas:

A - Os iniciadores podem ser arbitrários respeitando a temperatura ótima de anelamento.

Incorreto. Os iniciadores (primers) não podem ser arbitrários; eles devem ser específicos para as sequências de DNA alvo. A especificidade garante que apenas a sequência de interesse seja amplificada. A temperatura de anelamento (temperatura em que os primers se ligam ao DNA molde) deve ser otimizada, mas isso não significa que os primers possam ser escolhidos arbitrariamente.

C - Para uma boa amplificação é necessária uma grande concentração do DNA molde.

Incorreto. A PCR é uma técnica tão sensível que pode amplificar eficientemente até mesmo quantidades muito pequenas de DNA molde. Não é necessário ter uma grande concentração de DNA inicial.

D - Os oligonucleotídeos devem apresentar complementariedade entre as sequências de iniciadores utilizados.

Incorreto. Os oligonucleotídeos (primers) devem ser complementares às extremidades opostas da sequência alvo no DNA molde, e não entre si. Se fossem complementares entre si, isso causaria a formação de dímeros de primers, o que é indesejável e prejudicaria a amplificação correta do DNA alvo.

E - Durante a etapa de desnaturação ocorre a complementariedade dos oligonucleotídeos.

Incorreto. A etapa de desnaturação na PCR é quando a dupla fita de DNA é separada em fitas simples pelo aquecimento. A complementariedade dos oligonucleotídeos (anelamento) ocorre na etapa de anelamento, quando a temperatura é reduzida para permitir que os primers se liguem às sequências alvo no DNA molde.

Espero que essa explicação tenha esclarecido suas dúvidas sobre a técnica de PCR e a justificativa das alternativas. Se precisar de mais alguma ajuda, estarei à disposição!

Alternativa B - CORRETA

"MgCl2: Obrigatório para o funcionamento da enzima, o MgCl2 é encontrado na solução de reação em concentrações em torno de 0,5 a 2,5 mM. Como todo íon, pode afetar as temperaturas de desnaturação das fitas de DNA e de anelamento de primers."

Questão complementar: Q1085912