Com relação à reação de polimerização em cadeia (PCR), anal...
1) As etapas básica da PCR acontecem na seguinte ordem: desnaturação, polimerização e anelamento de oligonucleotídeos. 2) O produto amplificado na PCR pode ser visualizado em gel de agarose desde que tenha um corante de DNA. 3) Na polimerização, é utilizado cada um dos quatro dNTP como substrato da reação de amplificação. 4) A cada ciclo de polimerização, dobra a quantidade de DNA, sendo o resultado um acúmulo linear do fragmento específico de DNA. 5) Os parâmetros de amplificação dependem do DNA molde e do oligonucleotídeos.
Estão corretas, apenas:
C2, 3 e 5.
1- errado pois, as etapas são: Desnaturação, anelamento e polimerização.
2- CORRETO.
3- CORRETO.
4- errado pois a cada ciclo completo da PCR (desnaturação, anelamento e extensão), a quantidade de DNA duplica. Isso ocorre porque a extensão ou polimerização da nova fita de DNA sintetizada durante cada ciclo resulta em uma cópia adicional do fragmento específico de DNA. Portanto, o resultado é um acúmulo exponencial, não linear, do fragmento específico de DNA.
5- CORRETO
LETRA: C.
A alternativa correta é a C - 2, 3 e 5.
Para entender a questão e chegar à resposta correta, é preciso ter conhecimento sobre a técnica de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase), que é um método utilizado para amplificar sequências específicas de DNA. Vamos analisar cada uma das afirmativas corretas:
2) O produto amplificado na PCR pode ser visualizado em gel de agarose desde que tenha um corante de DNA. Esta afirmativa está correta. Após a PCR, os produtos de DNA são frequentemente visualizados em géis de agarose, que são corados com corantes específicos para DNA, como o brometo de etídio ou o SYBR Green, permitindo que os fragmentos sejam observados sob luz ultravioleta.
3) Na polimerização, é utilizado cada um dos quatro dNTPs como substrato da reação de amplificação. Esta afirmativa é verdadeira. Os dNTPs (deoxirribonucleotídeos trifosfatos) são os blocos construtores de DNA que a Taq polimerase usa para sintetizar novas cadeias de DNA durante a PCR. Os quatro tipos de dNTPs (dATP, dCTP, dGTP e dTTP) são necessários para formar as novas cadeias de DNA complementares à sequência molde.
5) Os parâmetros de amplificação dependem do DNA molde e dos oligonucleotídeos. Essa afirmativa também está correta. Os oligonucleotídeos, também conhecidos como primers, são sequências curtas de nucleotídeos que são complementares às regiões que flanqueiam a sequência de DNA de interesse. A eficiência da PCR e os parâmetros como temperatura de anelamento e número de ciclos são ajustados com base nas características do DNA molde e dos primers utilizados.
As demais afirmativas têm erros conceituais:
A afirmativa 1 está incorreta porque a ordem das etapas básicas da PCR é: desnaturação, anelamento (ou hibridização) dos oligonucleotídeos, e extensão (ou polimerização). A polimerização não precede o anelamento.
A afirmativa 4 está incorreta pois sugere um acúmulo linear de DNA, quando na verdade o acúmulo é exponencial. A cada ciclo de PCR, teoricamente, a quantidade de DNA duplica, levando a um aumento exponencial da quantidade de fragmento específico de DNA, e não linear.
Com essa análise, podemos concluir que a alternativa correta é a C, pois apenas as afirmativas 2, 3 e 5 são corretas.
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