O método tintorial predominante utilizado em bacteriologia é...

O método tintorial predominante utilizado em bacteriologia é o método de Gram. A respeito da técnica, analise as afirmativas a seguir e assinale a alternativa CORRETA.
I. O método original utilizava violeta-de-genciana. Hoje se utiliza outro tipo de cristal violeta, a solução de violetade-metila, que já contém fixador químico. Devido a isso, a fixação do esfregaço em chama caiu em desuso e é atualmente contraindicada.
II. A fucsina fenicada, utilizada como corante secundário por Gram, foi substituída pela safranina, um corante básico insolúvel em água. A safranina mantém-se mais distante da violeta no espectro de cor, diferenciado com maior nitidez as bactérias Gram-negativas, que assumem a cor vermelho-claro.
III. As bactérias que têm a parede celular composta por mureína durante o processo de descoloração do corante primário com álcool etílico, retém o corante. Já as bactérias com parede celular composta predominantemente por ácidos graxos perdem o complexo iodo-pararosanilina, assumindo a cor do corante de fundo.
IV. O controle de qualidade dos corantes e da coloração de Gram deve ser feito com cepas de Streptococcus pyogenes ATCC (Gram-negativa) e de Escherichia coli (Gram-positiva).
Estão CORRETAS as afirmativas: