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Ano: 2016 Banca: UFTM Órgão: UFTM Prova: UFTM - 2016 - UFTM - Tecnólogo - Química |
Q762539 Química
A eletroforese é uma técnica muito utilizada nos laboratórios de bioquímica, com a finalidade de acompanhar a purificação, a expressão e isolamento de proteínas para análise por espectrometria de massa ou determinar a massa molecular (Mr) da proteína. Analise as afirmações abaixo e escolha a alternativa CORRETA.
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Alternativa Correta: B - Eletroforese descreve a migração de uma partícula carregada sob influência de um campo elétrico.

Tema Central da Questão: A questão aborda a técnica de eletroforese, uma ferramenta essencial em laboratórios de bioquímica para a análise de proteínas. É crucial para estudantes de concursos públicos entenderem o funcionamento e as aplicações da eletroforese, uma vez que ela é amplamente empregada para a purificação e análise de biomoléculas.

Resumo Teórico: A eletroforese é um método que usa um campo elétrico para mover partículas carregadas através de um meio gelatinoso, como o gel de poliacrilamida no caso das proteínas. A técnica separa partículas com base em seu tamanho e carga elétrica, sendo especialmente útil na análise de proteínas e ácidos nucleicos. A eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) é uma variante comum que utiliza um detergente (SDS) para desnaturar proteínas, permitindo sua separação por tamanho.

Justificativa da Alternativa Correta: A alternativa B está correta porque descreve a essência da eletroforese: a migração de partículas carregadas sob a influência de um campo elétrico. Esse princípio básico é aplicável a várias formas de eletroforese, sejam elas em géis de agarose, poliacrilamida, ou outros métodos. Este conceito é fundamental e é consistentemente respaldado pela literatura científica e manuais de laboratório (referência: "Principles of Bioseparations Engineering", Raja Ghosh).

Análise das Alternativas Incorretas:

A - A afirmação de que géis de agarose possuem alta capacidade de resolução para proteínas está incorreta. Géis de agarose são usados principalmente para a separação de ácidos nucleicos, enquanto proteínas são geralmente separadas usando géis de poliacrilamida.

C - A eletroforese desnaturante (como SDS-PAGE) separa as proteínas principalmente pela massa molecular, não pela carga e forma, já que o SDS neutraliza as cargas e desnatura as proteínas.

D - No gel SDS-PAGE, as proteínas com maior massa molecular são encontradas na parte superior do gel, não na inferior, porque se movem mais lentamente pelo gel.

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Comentários

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a) Na eletroforese de proteínas é comum o uso de géis de poliacrilamida, pois a malha formada por este tipo de gel é com poros de menor tamanho, enquanto os géis de agarose formam poros com maior tamanho de malha, mais usados para moléculas maiores como o DNA.

b) correta

c) A eletroforese desnaturante faz uso do SDS, que tem como função atribuir carga negativa às proteínas, fazendo com que a separação se dê exclusivamente pela diferença de massa, visto que todas as proteínas agora possuem mesma carga.

d) Em uma eletroforese SDS-PAGE, as proteínas mais pesadas possuem menor mobilidade devido ao seu maior peso, e por isso se encontram na parte superior do gél.

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