Pesquisa da UFG desenvolve testes para detecção de linhage...

A alternativa correta é a B: transcrição reversa, que converte o RNA em DNA complementar (cDNA), e a PCR em tempo real (qPCR), que amplifica o cDNA e permite a quantificação precisa em tempo real.

Vamos entender o porquê:

RT-qPCR, ou Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real com Transcrição Reversa, é uma técnica extremamente poderosa na biologia molecular. Ela combina duas etapas essenciais:

1. Transcrição Reversa:

Neste estágio, o RNA é convertido em DNA complementar (cDNA) por meio da enzima transcriptase reversa. Isso é crucial porque o RNA viral precisa ser convertido em uma forma que possa ser amplificada e analisada, que no caso é o cDNA.

2. PCR em Tempo Real (qPCR):

Após a transcrição reversa, o cDNA é amplificado por PCR. O diferencial da qPCR é que ela permite a quantificação precisa do DNA em tempo real, monitorando a amplificação à medida que ela ocorre. Isso é essencial para a detecção e quantificação de material genético específico.

Agora, vamos analisar as alternativas incorretas:

A - Transcrição, que converte o DNA em RNA, e depois a tradução, que converte o RNA em proteínas contendo aminoácidos virais, que são detectados pelo teste em amostras:

Esta alternativa está incorreta porque descreve o processo de expressão gênica no sentido oposto ao necessário para a técnica RT-qPCR. Aqui, o RNA é o material inicial, não o DNA. E não há tradução de RNA em proteínas no procedimento de RT-qPCR.

C - Replicação da polimerase, que consiste na duplicação do DNA, e a tradução reversa, que consiste na produção de RNA a partir de proteínas virais detectáveis no teste em tempo real:

Esta alternativa está errada por várias razões. A replicação da polimerase e a tradução reversa não são termos técnicos corretos no contexto da RT-qPCR. Além disso, a produção de RNA a partir de proteínas não é um processo biológico correto.

D - Reação em cadeia da polimerase com Splicing, que consiste na remoção de íntrons e união de éxons no genoma viral, e a tradução posterior, originando proteínas virais detectáveis no teste:

Esta alternativa está incorreta porque a técnica de RT-qPCR não envolve splicing (processo de remoção de íntrons e união de éxons). O splicing é um processo que ocorre durante a maturação do RNA em eucariotos, não durante a detecção viral por RT-qPCR.

Portanto, a alternativa B é a correta porque descreve com precisão o processo de transcrição reversa seguido da amplificação e quantificação do DNA complementar (cDNA) por PCR em tempo real, que são as etapas-chave da técnica RT-qPCR.

RT-PCR é a técnica que busca amplificar RNA. Para isso, é necessário a ação de enzima transcriptase reversa para poder formar uma fita de DNA complementar (cDNA) a partir do RNA alvo. Após a formação do cDNA, a PCR segue com o padrão de ciclagem para replicar o cDNA. A RT-PCR inclui uma qPCR (PCR em tempo real).