Questões de Concurso Público FIOCRUZ 2010 para Tecnologista em Saúde - Desenvolvimento de Insumos Biológicos para a Saúde

Analise as afirmativas a seguir.
I. A técnica de DNA recombinante permite localizar, isolar, preparar e estudar pequenos segmentos de DNA, e seus produtos protéicos, derivados de cromossomos muito maiores. II. O primeiro organismo usado para a expressão heteróloga de proteínas usando a tecnologia do DNA recombinante foi o plasmódium Escherichia coli. III. Os plasmídeos são moléculas de DNA circular extra cromossomal que podem ser propagados prontamente por um organismo heterólogo permitindo a síntese de uma proteína pela inserção de genes de interesse numa nova combinação de DNA cromossomal ou extra cromossomal de acordo com o vetor de clonagem.
Assinale:

Os vetores de clonagem são carreadores de moléculas de DNA. Sobre as características mais comuns nesses vetores, analise as afirmativas a seguir.
I. Ser capaz de se auto-replicar, amplificando o segmento que eles carregam, de forma independente. II. Carregar genes marcadores de seleção, permitindo a identificação das células que contenham o vetor de expressão (por exemplo, genes que conferem resistência à antibióticos). III. Conter sequências únicas de reconhecimento por diferentes endonucleases de restrição presentes mais de uma vez no plasmídeo para permitir a inserção do cDNA de interesse.
Assinale:

A clonagem de um gene é somente o primeiro passo na tecnologia de DNA recombinante. A produção em ampla escala de uma proteína recombinante é o objetivo principal dos pesquisadores que utilizam essa técnica. Muitos organismos podem ser usados para expressão de proteínas em sistemas heterólogos. Nos sistemas de expressão disponíveis é correto afirmar que podemos expressar proteínas em:

A proteína XK14 deve ser expressa e purificada para ensaios funcionais. O cDNA que codifica essa proteína contém uma região de transcrição que sinaliza para secreção. A proteína madura possui pI 7,7 e massa molecular de 19,3 kDa. Sabe-se que a forma ativa dessa proteína é dependente de glicosilação, portanto o sistema de expressão terá papel importante para a manutenção da atividade biológica. Com base nessas informações é mais correto dizer que a proteína ativa:

Considerando que a proteína é XK14 é secretada para o meio de cultura e que a expressão máxima é obtida após 70 horas, é correto afirmar que os passos de purificação iniciais serão: