Sobre a técnica ELISA, assinale a alternativa incorreta.

Olá, aluno!

A alternativa incorreta nesta questão é a Alternativa E. Vamos entender detalhadamente o porquê e revisar os outros conceitos abordados.

Alternativa E: a técnica de ELISA consiste na precipitação de um antígeno pela interação com o anticorpo específico. O processo resulta num grau de pureza e no enriquecimento de uma proteína de interesse.

Essa alternativa está incorreta porque o ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) é uma técnica utilizada para detectar e quantificar substâncias como proteínas, anticorpos e hormônios. Ele não envolve precipitação, mas sim a ligação de um anticorpo a um antígeno imobilizado em uma superfície. Após essa ligação, uma enzima ligada ao anticorpo gera um sinal detectável, geralmente uma mudança de cor. Portanto, não se trata de um método de precipitação, mas de detecção e quantificação.

Agora, vamos entender por que as outras alternativas estão corretas:

Alternativa A: no ELISA direto, o anticorpo primário pode ser conjugado ao repórter cromogênico.

No ELISA direto, o anticorpo primário é diretamente ligado ao antígeno na placa e conjugado a uma enzima que reage com um substrato para produzir um sinal detectável, como uma mudança de cor. Isso está correto.

Alternativa B: no ELISA sanduíche indireto, pode ocorrer a utilização de três anticorpos, sendo um deles conjugado ao repórter cromogênico ou fluorescente e dois específicos para o antígeno.

O ELISA sanduíche indireto utiliza múltiplos anticorpos. Um anticorpo de captura fixa o antígeno na placa, um segundo anticorpo detecta o antígeno, e um terceiro anticorpo, conjugado a uma enzima (repórter), gera o sinal. Esta descrição está correta.

Alternativa C: no ELISA competitivo, um anticorpo primário não marcado é imobilizado na placa de microtitulação e é incubado com antígenos não marcados. Após esta reação, o antígeno, conjugado a um cromóforo repórter, é adicionado e este conjugado se liga ao anticorpo primário no sítio de ligação que não estiver ocupado pelo antígeno não marcado.

O ELISA competitivo funciona dessa maneira: o antígeno marcado compete com o antígeno não marcado pelo sítio de ligação no anticorpo. Quanto mais antígeno não marcado houver, menos antígeno marcado se ligará, resultando em um sinal inversamente proporcional à concentração de antígeno na amostra. Esta descrição está correta.

Alternativa D: no ensaio de ELISA, a densidade ótica da amostra é comparada com uma curva padrão determinada por uma diluição seriada de uma solução contendo uma concentração conhecida.

Para quantificar os resultados do ELISA, a densidade ótica (DO) da amostra é comparada com uma curva padrão. Esta curva é gerada usando diluições seriadas de uma solução com concentração conhecida do antígeno ou anticorpo. Esta descrição está correta.

Espero que esta explicação tenha esclarecido o tema da questão e as razões pelas quais a alternativa E está incorreta. Se tiver dúvidas adicionais, estou à disposição para ajudar!

Na técnica de ELISA não tem precipitação o que ocorre é uma reação enzimática !

na técnica ELISA utiliza-se marcadores fluorescentes