O processo de extração de DNA, consiste basicamente em rompe...
Com auxílio das informações do texto a seguir responda às questões 42 e 43.
Sabrina foi vítima de estupro e após exame no Instituto Médico-Legal, os peritos enviaram para análise uma amostra de suas vestes contendo uma mancha esbranquiçada. A partir da realização de um teste, ficou caracterizada a presença de sêmem no tecido. Após o depoimento da vítima, dois irmãos, Bruno e Carlos, foram convocados para a realização de exame de DNA.
O processo de extração de DNA, consiste basicamente em romper as células, separar suas moléculas dos outros materiais celulares e isolá-las em formato compatível para a próxima aplicação, incluindo a amplificação por PCR. Essa extração pode ser realizada através de diversas técnicas:
I. Uma resina quelante, que captura os íons de magnésio, impedindo a atuação das enzimas que destroem o DNA.
II. Fenol-clorofórmio, utilizado para separar o DNA das proteínas e restos celulares.
III. Papel FTA, um papel especial que possui substâncias que protegem o DNA da degradação por esterases, impedem o desenvolvimento de bactérias.
IV. Beads magnéticas, que adsorvem o DNA, possibilitando sua separação do meio.
Está(ão) correta(s) a(s) afirmativa(s):
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O tema central da questão refere-se às técnicas de extração de DNA. Para resolver esta questão, é necessário compreender os métodos laboratoriais utilizados para isolar e preparar o DNA para análises subsequentes, como a amplificação por PCR.
A alternativa correta é: D - Somente I, II e IV.
Justificativa da alternativa correta:
I. Resina quelante: Este método é válido, pois a resina quelante captura íons de magnésio, que são cofatores fundamentais para enzimas que poderiam degradar o DNA. Ao remover esses íons, o DNA é preservado para análise.
II. Fenol-clorofórmio: Esta técnica é clássica na extração de DNA, onde o fenol-clorofórmio é usado para separar o DNA de proteínas e outros materiais celulares.
IV. Beads magnéticas: Este método é eficaz, pois as beads magnéticas adsorvem o DNA, permitindo a sua separação do restante do material celular.
Alternativas incorretas:
III. Papel FTA: Apesar de proteger o DNA de degradação e impedir o crescimento bacteriano, o papel FTA não é uma técnica de extração de DNA no sentido tradicional. Ele é mais utilizado para estabilizar e armazenar amostras em campo.
Análise das alternativas:
Alternativa A - Somente II: Incorreta, pois ignora as técnicas I e IV, que também são métodos reconhecidos de extração de DNA.
Alternativa B - Somente I e III: Incorreta, pois III não é uma técnica de extração e II deveria ser incluída como correta.
Alternativa C - Somente II e IV: Incorreta, pois omite a técnica I, que é válida para a extração de DNA.
Alternativa E - I, II, III e IV: Incorreta, pois inclui III, que não é uma técnica tradicional de extração de DNA.
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O papel FTA consiste em uma matriz de celulose impregnada com diversos reagentes: tampão forte, desnaturantes proteicos, agentes quelantes, armadilha de radicais livres (absorve a luz UV).
A amostra aplicada no cartão de papel FTA é lisada, e os ácidos nucleicos são imobilizados e estabilizados. Seus reagentes protegem o DNA da degradação por nucleases e impedem o crescimento de microrganismos. O DNA pode ser armazenado no cartão à temperatura ambiente e será estável por vários anos.
FTA paper é uma forma de armazenamento de DNA, e não de extração.
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