As seguintes etapas constituem a reação em cadeia da polime...

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Ano: 2011 Banca: COPEVE-UFAL Órgão: UFAL Prova: COPEVE-UFAL - 2011 - UFAL - Biólogo |
Q86609 Biologia
As seguintes etapas constituem a reação em cadeia da polimerase (PCR), onde milhões de cópias do fragmento de DNA que se quer amplificar são gerados,

I. Desnaturação do DNA genômico (94ºC, 30s).

II. Anelamento dos iniciadores no DNA genômico (30-60ºC, 30s).

III. Desnaturação do DNA genômico (94ºC, 5min).

IV. Síntese do DNA pela polimerase (72ºC, 2-5 min).

a sequência correta da reação apresentada está na opção
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A questão exige conhecimentos acerca da técnica de PCR e suas etapas, colocando-as na ordem em que acontecem. Das fases citadas, o primeiro acontecimento é a desnaturação do DNA genômico por 5 minutos (III), para que as fitas se separem. Em seguida, acontece o anelamento dos iniciadores (ou primers) no DNA genômico, o que dura cerca de 30 segundos (II). Depois do anelamento com os primers é hora da extensão: a Taq polimerase age, sintetizando o DNA a partir da fita molde, o tempo estimado é de 2 a 5 minutos (IV). Por último, temos a desnaturação rápida (30 segundos) do DNA formado para servir de molde para o próximo ciclo (I). Esse ciclo de três etapas (III-II-IV) se repete várias vezes, aumentando assim o número de fragmentos de DNA de interesse.


Letra C correta.


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Gab. C

 

O processo de PCR é utilizado para amplificar determinado trecho do DNA. Para  esta construção é preciso alguns " assessórios" importantes como primers ( extensões de oligoncleotídeos, de sequência conhecida, para conjugar a determidada parte do DNA), solução tampão, TAQ polimerase ( enzima decontrole de temperatura).

Inicia a reação com  a desnaturação da dupla fita de DNA ( 94°c) ; em seguida o anelamento dos primers com as fitas simples ( 30-60ºC, 30s); Síntese do DNA pela polimerase, promovendo a expansão do seguimento que se deseja (72ºC, 2-5 min); Desnaturação do DNA genômico para realização de um novo ciclo, que gira em torno de 30 a 40 vezes (94ºC, 30s).

Gab. C

Ciclo da PCR:

- Desnaturação - 94ºC

- Anelamento (hibridação) - cerca de 50ºC (temperatura crítica), 30s

- Extensão - 72ºC (temperatura ótima da DNA polimerase), 2-5min

- Desnaturação para novo ciclo - 94ºC, 30s

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