Considere as seguintes condições cromatográficas em HPLC pa...

Vamos analisar a questão que trata sobre o uso de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC), um método amplamente utilizado no controle de qualidade farmacêutico para separar, identificar e quantificar componentes em uma mistura. A questão fornece detalhes sobre uma análise cromatográfica e pede que identifiquemos a afirmação correta baseada nessas condições.

Alternativa Correta: C

A alternativa C indica que ao modificar a fase móvel para uma mistura de tolueno: acetonitrila (60:40, v/v), o tempo de retenção (Tr) das substâncias na coluna diminuiria. Isso está correto porque aumentar a proporção de acetonitrila (um solvente mais polar que o tolueno) geralmente diminui o tempo de retenção das substâncias. Isso ocorre porque a acetonitrila interage menos com a fase estacionária de sílica, acarretando uma passagem mais rápida das moléculas pela coluna.

Justificativa para as alternativas incorretas:

A - A afirmação sugere que o produto de degradação é mais apolar por interagir mais com a fase estacionária. Embora o tempo de retenção longo possa indicar maior apolaridade em uma fase estacionária polar, é preciso considerar que outras interações podem influenciar esse comportamento. Assim, essa afirmação é uma generalização que não se aplica sempre.

B - A substituição por uma coluna C-18 de fase reversa com eluente metanol:água (80:20) não necessariamente aumenta o tempo de retenção para a substância 3. Em uma coluna de fase reversa, as substâncias mais apolares tendem a reter mais, mas a composição diferente do eluente e interações específicas podem variar esses resultados.

D - A redução do fluxo de 1,0 mL/min para 0,5 mL/min não altera diretamente o fator de capacidade (K') do fármaco, que é mais influenciado pela composição da fase estacionária e móvel. Mudanças no fluxo afetam tempo de análise, não a capacidade.

E - Reduzir o tamanho da partícula para 2,5 µm aumentaria o número de pratos teóricos, melhorando a eficiência da separação, não a reduziria. Isso pode, de fato, acelerar análises devido a menores alturas equivalentes a um prato teórico (HETP), mas não pela redução do número de pratos.

Espero que essa explicação tenha facilitado sua compreensão sobre como abordar questões de HPLC em concursos. Se você tiver mais dúvidas, estou aqui para ajudar. Gostou do comentário? Deixe sua avaliação aqui embaixo!

Alguém saberia explicar o erro da letra A?

FE polar e FM apolar. Dessa forma, maiores tempo de retenção indicando maior polaridade do composto.

Daniela, o ítem A estaria correto se a coluna fosse de fase reversa. Como o solvente tem tolueno, que é apolar, e não a costumeira água com acetonitrila, subentende-se se tratar de uma coluna de fase normal, onde quanto mais polar o solvente, menor seu tempo de retenção.

Daniela, o produto de degradação realmente passa mais tempo retido na coluna e, por isso, possui maior tempo de retenção. Contudo, a letra A afirma que isso acontece porque ele é Apolar, mas é exatamente o contrário, o produto de degradação é mais polar e, por isso, fica mais tempo retido, pois a Fase Estacionária é mais polar que a Fase Móvel.