Questões de Concurso Sobre biologia molecular em biomedicina em biomedicina - análises clínicas

Atualmente, a PCR em Tempo Real é uma das técnicas mais utilizadas para diferentes diagnósticos e exames como: identifcação de agentes infecciosos, alterações dos cromossomos, determinação de paternidade, genealogia, identificação de pessoas ou amostras, síndromes genéticas, propensão a doenças (testes prediƟ vos) etc. Sobre esta técnica para a fi nalidade diagnóstica é INCORRETO afirmar que:

Em sistemas onde se usa a referência passiva, para uniformizar e normalizar a absorção da fluorescência em toda a placa, o filtro D (≈610 nm) não fica disponível para a reação multiplex. É correto afirmar que:  

Diferentes sistemas e fluorescências podem ser utilizados para a técnica de PCR em Tempo Real. Historicamente, o PCR em Tempo Real vem evoluindo em relação a quantidade de filtros e, consequentemente, capacidade de multiplexação de alvos. Neste senƟ do, um pesquisador pretende desenvolver um ensaio pentaplex, sem referência passiva, para diferenciar diferentes patógenos. Visando um ensaio diagnóstico com alta sensibilidade e especificidade, a combinação de fluoróforos viável em relação ao espectro de fluorescência de um equipamento de PCR em tempo Real de 6 canais. É correto afirmar que:

A técnica de amplificação em cadeia da polimerase (PCR) é composta por três etapas: desnaturação da dupla fita de DNA, anelamento dos oligonucleoơ deos e extensão da cadeia. É correto afirmar que:

Durante as últimas décadas, o desenvolvimento de novos insumos e equipamentos permitiram a evolução da PCR convencional para um novo sistema que amplifica e detecta os produtos de PCR em Tempo Real, tornando esta técnica a mais utilizada no momento para o diagnóstico molecular. Sobre a PCR em Tempo Real, uma inovação tecnológica resultante da PCR convencional, é correto afi rmar que:  

Para garantir o desempenho de um produto de diagnóstico molecular, se faz necessário o processamento de controles positivo, negativo e interno. Os controles minimizam possíveis erros técnicos, contaminações, resultados falso negativos e falso positivos, além de garantir uma avaliação do desempenho do produto. Caso um produto de diagnóstico molecular possua VLP (“Virus Like Particle”) como controle em sua composição, é correto afi rmar que: 

As limitações dos métodos de sequenciamento de primeira geração levaram ao desenvolvimento de tecnologias de sequenciamento de nova geração, que são capazes de realizar sequenciamento paralelo massivo de DNA. O sequenciamento de segunda e de terceira geração são denominados: 

O sequenciamento genético é uma técnica desenvolvida nos anos 70 e ganhou força em meados da década de 80 com o sequenciamento de Sanger. No entanto, foi com o surgimento do Sequenciamento de Nova Geração (NGS) que houve uma revolução na maneira de se realizar a análise do DNA. As metodologias de sequenciamento de DNA que são consideradas de nova geração:

A descoberta da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR – “Polymerase Chain Reaction”) em 1986 permitiu consolidar nas últimas duas décadas o desenvolvimento de novas linhas de pesquisa básica e aplicada na área de reativos para diagnóstico. Esta técnica permite, a partir de uma pequena quantidade de ácido nucleico, amplificar diversas vezes em escala exponencial a região alvo aumentando a quantidade de material a ser analisada viabilizando assim a detecção da presença ou ausência de vírus, bactérias ou qualquer sequência de interesse. Baseado na metodologia de PCR para o diagnóstico, a partir da detecção de retrovírus, para um ensaio mais sensível e específico é correto afi rmar que: 

A necessidade de quantificação molecular de amostras se tornou rotina em numerosos patógenos virais e circunstâncias clínicas incluindo infecções crônicas como o HIV, HCV e HBV para os quais a carga viral pode indicar a progressão da infecção e a resposta do paciente à terapia. Entretanto, o cálculo da carga viral para uma amostra pode variar significativamente entre diferentes ensaios PCR em Tempo Real quantitativo. A alternativa que NÃO explica a variação é: 

A extração de ácidos nucleicos, isolamento do DNA ou RNA, é um processo que pode ser realizado em diferentes Ɵ pos de amostras. Existem vários métodos, cada um deles é destinado a aplicações distintas. A metodologia usada para detecção de um vírus com genoma RNA, por exemplo, pode não ser a mais adequada para fins diagnósticos ou para a prática de PCR de protozoários. Assim, os métodos podem ter diferentes desempenhos sobre a extração de ácidos nucleicos, purifi cando o material para realizar uma análise adequada. Baseado nos conceitos de extração de ácidos nucleicos, é INCORRETO afi rmar que

Para a prevenção do risco de contaminação dentro de um laboratório de biologia molecular é INCORRETO afi rmar que: 

Um pesquisador necessita solicitar a síntese de novos iniciadores para o desenvolvimento de um novo ensaio diagnóstico. Baseado na sequencia 5’ TAC AGT TTG CGA T 3’, a sequência correta de iniciador que corresponde a ordem de bases nitrogenadas do iniciador reverso a ser solicitado é:

Os métodos moleculares microbiológicos (MMM) têm sido utilizados como forma de identificar e quantificar os microrganismos presentes nos sistemas de petróleo e têm colaborado com grande auxilio nas etapas de mitigação e monitoramento da biocorrosão. A denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) é uma técnica que utiliza o DNA e a tecnologia de polymerase chain reaction (PCR) para diferenciar as espécies presentes em uma comunidade a partir de uma única amostra. Nesse MMM, os fragmentos de DNA são então transferidos para um gel gradiente desnaturante, separados com base em sua sequência de DNA. O DNA migra através do gel e as diferentes fitas de DNA presentes na amostra serão depositadas em intervalos diferentes no gel, como mostra a figura a seguir:







Considerando os princípios da técnica de DGGE enquanto um MMM para identificar e/ou quantificar os microrganismos agentes da biocorrosão, analise as afirmativas abaixo:


I. O grau de desnaturação da fita de DNA depende de sua composição de sequência de nucleotídeos, os pares de bases A– T são mais fortes do que o par G–C, e a desnaturação parcial resulta em uma diminuição da mobilidade através do gel com a formação de uma banda de DNA.


II. A DGGE separa os produtos por diferenças de sequência de DNA, o grau de desnaturação da fita de DNA depende de sua composição de sequência de nucleotídeos. Portanto, durante a DGGE os produtos com diferentes composições, embora com números semelhantes de pares de bases, irão migrar diferentes distâncias através do gel quando expostos a um gradiente de condições desnaturantes.


III. Um gel com poucas bandas e uma única banda espessa, indica uma comunidade dominada por uma única espécie, e um gel com muitas bandas de intensidade semelhante indica uma comunidade diversa dentro de uma espécie. A comparação das comunidades em diferentes amostras, de diferentes locais ao longo de um sistema de processo, fornece informações significativas sobre os ambientes ao longo do processo e como isso afeta as populações microbianas.

Assinale