Questões de Biomedicina - Análises Clínicas para Concurso

Segundo Kraus & Arduin (1997), a montagem de lâminas histológicas consiste em depositar o material biológico numa lâmina de vidro e cobrir com lamínula. Nesse processo é necessário colocar um meio junto com o material, que o preservará por algum tempo e garantirá a união da lamínula com a lâmina. No entanto, é possível a obtenção de laminas histológicas permanentes, e para isso, emprega-se o uso da histotécnica, que é um conjunto de procedimentos para confeccionar preparados histológicos. Acerca dos meios de montagem das lâminas permanentes, é correto afirmar que

Diferente do que ocorre no processamento de amostra para observação e análise em microscopia óptica, na microscopia eletrônica os meios de infiltração e inclusão não são a parafina, mas sim um material que promova sustentação e rigidez às amostras a serem analisadas e que permita a posterior obtenção de cortes semifinos e ultrafinos. Várias substâncias são utilizadas como meios de inclusão em microscopia eletrônica. No entanto as resinas plásticas (epóxi) e acrílicas são as que têm sido mais comumente utilizadas. Essas resinas devem possuir características que facilitem a infiltração e, depois de polimerizadas, permitam a contrastação dos cortes e estes devem ser resistentes à incidência do feixe eletrônico do microscópio. Dentre as resinas acrílicas comercializadas, assinale a alternativa cuja resina apresente a definição a seguir:
Um derivado do metacrilato, foi desenvolvida para ser utilizada tanto em microscopia óptica quanto microscopia eletrônica. Essa resina não interage nem forma ligações cruzadas com proteínas ou ácidos nucléicos expostos na inclusão, assim favorecendo a detecção posterior destes componentes. Ela, também, é compatível com todos os solventes normalmente usados na desidratação e pode ser polimerizada por temperatura de 50ºC à 60°C ou por luz UV a baixa temperatura (-20°C).

A técnica de perfusão cardíaca é uma técnica de fixação tecidual muito utilizada para obtenção de material para exame diagnóstico ou estudo acadêmico e resulta em boas preparações histológicas, uma vez que simula o funcionamento do sistema circulatório para levar através dos vasos sanguíneos, soluções químicas que perfundem até os tecidos, preservando a sua estrutura de forma mais eficaz. Considerando os procedimentos necessários para a realização de uma boa perfusão cardíaca que garanta a obtenção de tecidos perfeitamente preservados durante a sua fixação, avalie as afirmativas a seguir:
I. A perfusão cardíaca consiste inicialmente na retirada da circulação sanguínea através da lavagem feita com uma solução salina de pH alcalino (pH 8,0) e anticoagulante, que é seguida da etapa de fixação feita pela injeção da solução fixadora. II. Tanto na injeção da solução de lavagem, quanto na solução fixadora, ambos os fluidos são impulsionados nos vasos sanguíneos através de tubos que se conectam a uma bomba peristáltica e a um grande vaso do animal a ser perfundido, como o arco aórtico, por exemplo. É importante regular a pressão de injeção da solução, a fim de não exceder a pressão sanguínea, para não haver a formação de artefatos devidos à fixação. III. A técnica da perfusão cardíaca, para ser bem-sucedida, um fator importante é a ausência de sangue coagulado nos vasos sanguíneos. Para isso, é conveniente administrar heparina diluída a 1:50 (v/v) ao animal 10 minutos antes do seu sacrifício. A filtração das soluções é, também, um cuidado que evita a obstrução dos pequenos vasos sanguíneos e a obstrução do fluxo das soluções através dos tecidos.
Assinale

Em microscopia óptica, a microtomia consiste em executar cortes bem finos com espessura de 3 a 6 micrômetros para a passagem de luz e observação do tecido ao microscópio. O equipamento utilizado para a obtenção desses cortes é o micrótomo. Embora existam vários tipos de micrótomos, o mais utilizado na técnica histológica de rotina é o micrótomo rotatório. Dentre as alternativas a seguir, assinale aquela que não corresponde a uma boa prática para a obtenção de cortes para análise à microscopia de luz.

A fixação é uma das etapas mais importantes da técnica histológica, porque interrompe o metabolismo celular, estabilizando as estruturas e os componentes bioquímicos intra e extracelulares, preservando e conservando os elementos teciduais, além de promover a penetração de outras substâncias subsequentes à fixação. Atualmente, os fixadores são classificados segundo Leong (1996), que teve como base a classificação desenvolvida por Hopwood (1977), sem muitas alterações. Segundo a classificação de Leong, com relação aos fixadores aldeídos, está correto afirmar que