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Q568441

Biomedicina - Análises Clínicas Biologia Molecular em Biomedicina ,

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Médico alergista e imunologista |

Q568441 Biomedicina - Análises Clínicas

A hibridação in situ cromogênica pode ser utilizada para detectar HPV (papilomavirus humano), vírus herpes simples tipo 1 e 2 (HSV-1 e HSV-2) e outros patógenos virais em biópsias. Com relação a esta técnica, assinale a afirmativa correta.

Alternativas

A hibridação in situ cromogênica é mais indicada para biópsias de tecido do que a hibridação in situ fluorescente (FISH) pois permite a manutenção da morfologia do tecido.

Não é possível realizar hibridação in situ cromogênica e exame citológico para HPV na mesma amostra.

A amplificação com biotinil-tiramida (Tyramide Signal Amplification, TSA) pode ser utilizada para amplificar o sinal de uma hibridação in situ cromogênica, mas não de uma hibridação in situ fluorescente (FISH).

A hibridação in situ cromogênica somente pode ser realizada com sondas de ADN.

Uma das vantagens da hibridação in situ cromogênica em relação à hibridação in situ fluorescente (FISH) é a maior resistência das sondas cromogênicas à degradação pela exposição à luz ambiente.

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Q568439

Biomedicina - Análises Clínicas Biologia Molecular em Biomedicina ,

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Médico alergista e imunologista |

Q568439 Biomedicina - Análises Clínicas

Texto associado

Baseado na figura responda à questão

A figura abaixo representa sequências de ácidos nucléicos para técnica de hibridização in situ para diagnóstico molecular.

A técnica de hibridização in situ pode utilizar diversas estratégias de acordo com seu propósito. Sendo assim, assinale a afirmativa correta:

Alternativas

Na figura os números 3 e 4 representam uma hibridização sonda/alvo, respectivamente, ADN/ARN e ARN/ADN.

Na figura o número 5 representa uma hibridização de ARN dupla fita.

Na figura os números 1 e 2 representam moldes (templates) de ADN.

Na figura o número 1 representa uma sonda fluorescente de ARN.

Na figura o número 2 representa uma sonda fluorescente de ADN.

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Q568438

Biomedicina - Análises Clínicas Biologia Molecular em Biomedicina ,

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Médico alergista e imunologista |

Q568438 Biomedicina - Análises Clínicas

Texto associado

Baseado na figura responda à questão

A figura abaixo representa sequências de ácidos nucléicos para técnica de hibridização in situ para diagnóstico molecular.

A detecção de ácidos nucléicos derivados de vírus ou bactérias pode ser essencial para o diagnóstico de uma doença. Sendo assim, assinale a afirmativa correta.

Alternativas

O protocolo de hibridização in situ leva em consideração a origem da sonda, ou seja, se for para detectar bactérias não se deve utilizar plasmídios como molde para sondas.

Quando a suspeita é infecção de retrovírus, a melhor opção é utilizar uma sonda construída com Uracila e Timidina para garantir uma reação mais eficaz.

Uma estratégia para hibridização ADN/ADN, é tratar o material com ARNase, evitando assim hibridização inespecífica com moléculas de ARN.

A vantagem da hibridização in situ é que pode-se aplicar sondas utilizadas em PCR.

Após a reação de hibridização in situ, deve-se sequenciar o resultado da hibridização para identificar o agente patogênico.

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Q568436

Biomedicina - Análises Clínicas Biologia Molecular em Biomedicina ,

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Médico alergista e imunologista |

Q568436 Biomedicina - Análises Clínicas

Imagem associada para resolução da questão

A figura acima é o resultado de uma hibridação in situ fluorescente (FISH) para detectar a presença de bacilos de Helicobacter pylori em uma amostra de biópsia gástrica.

Com relação ao tema, assinale a afirmativa correta.

Alternativas

FISH só pode ser realizada com sondas marcadas diretamente com fluoróforos.

Antes de ser observada ao microscópio, a amostra acima foi revelada em uma emulsão fluorogênica.

FISH é mais sensível do que a hibridação in situ cromogênica.

O sinal positivo observado na figura acima foi gerado pela hibridação de sondas fluorescentes que hibridaram com proteínas de membrana da H. pylori, o que permitiu sua observação no corte histológico.

Ao contrário dos fluoróforos utilizados para conjugar anticorpos, o comprimento de onda utilizado para excitação dos fluoróforos utilizados em FISH deve ser sempre maior do que seu comprimento de onda de emissão, devido à interferência das bases nitrogenadas dos ácidos nucléicos aos quais estão conjugados.

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Q568038

Biomedicina - Análises Clínicas Biologia Molecular em Biomedicina ,

Ano: 2010 Banca: FGV Órgão: FIOCRUZ Prova: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Operação de Laboratório de Nível de Segurança |

Q568038 Biomedicina - Análises Clínicas

Sobre a técnica de PCR em Tempo Real, assinale a afirmativa incorreta.

Alternativas

A utilização de sondas marcadas com fluorocromos em uma reação de PCR em tempo real é, na maioria das vezes, mais específica do que a utilização de corantes de DNA fluorescentes como SYBR green.

A técnica de PCR em tempo real pode ser utilizada para se monitorar a carga do microorganismo presente no indivíduo infectado.

Tanto as sondas do tipo TaqMan quanto as do tipo molecular beacons são oligonucloetídeos que possuem um fluoroforo ligado à extremidade 5' e um quencher ligado à extremidade 3'.

No PCR em Tempo Real, entende-se por ∆Rn a diferença entre o valor da detecção da reação contendo a amostra de interesse (Rn+) e o valor da detecção da reação controle sem amostra (Rn-).

Para as reações de PCR em tempo real multiplex utilizadas para diagnóstico molecular, pode-se utilizar tanto sondas quanto SYBR Green para a detecção dos produtos amplificados.

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169: C

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