Questões de Concurso Público FIOCRUZ 2010 para Tecnologista em Saúde - Micobactérias
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As suspensões foram incubadas a 37°C por 30 min e analisadas a 488nm com FACScam flow cytometer (Becton Dickinson Immunocytometry Systems) utilizando FAC Scan Lysys II software para a acquisição de dados e análise. Os gráficos resultantes estão na figura abaixo.
Legenda da Figura: Os números nos eixos y e x de cada painel são 100 , 101 , 102 , 103 e 104 , respectivamente.
Usando seus conhecimentos de citometria de fluxo e micobacteriologia laboratorial, assinale a alternativa correta.
Sobre os detalhes técnicos para a metodologia citada quando aplicada para espécime clínico do tipo escarro espontâneo e de forma direta, analise as seguintes afirmativas.
I. O número mínimo de BAAR necessário para produzir um esfregaço com resultado positivo é estimado entre 100 a 1000 por mililitro (probabilidade de 50% de resultado positivo).
II. A Secretaria de Vigilância em Saúde do Ministério da Saúde recomenda, para o preparo do esfregaço, o uso de Bico de Bunsen ou Cabine de Segurança Biológica, de luvas e de outros Equipamentos de Proteção Individual, em área exclusiva apropriada, sem circulação de pessoas, sem correntes de ar, e com exaustor contendo renovação do ar (seis a 10 renovações por hora).
III. A técnica mundialmente utilizada consiste na coloração do esfregaço pelo método de Ziehl-Neelsen sob metodologia padronizada e observação em microscopia de campo claro com uso de óleo mineral e aumento total de 100X.
Assinale:
No diagnóstico bacteriológico, as micobactérias são Grampositivas fracas, sendo então submetidas a procedimentos que permitem a detecção de sua resistência a álcool-ácido. Essa propriedade, presente em outros gêneros bacterianos, pode levar ao diagnósitico impreciso, devendo ser confirmado por cultura e por identificação definitiva.
Considerando os princípios da baciloscopia, assinale a alternativa incorreta.
Com base nos achados ilustrados acima, sobre as interpretações finais dos exames baciloscópicos dos escarros do paciente, assinale a alternativa correta.
I. As principais espécies de micobactérias de crescimento rápido podem ser diferenciadas com os testes de produção de pigmentação, de crescimento em Löwestein-Jensen contendo ácido p-nitrobenzóico, de inibição do crescimento em meio de Sauton contendo ácido pícrico, em ágar nutriente, em meio com NaCl a5%, produção de pirazinamidase, de produção de arilsulfatase (3 e 15 dias), hidrólise de Tween 80, de produção de β-galactosidase, de redução do telurito de potássio, de redução de nitrato, de produção de urease,de crescimento a 25°C e de crescimento a 45°C.
II. O método PRA-hsp65 é baseado em metodologia molecular e deve ser combinado com avaliação das cepas de micobactérias por testes fenotípicos tais como os de morfologias macro- e microscópica da cultura micobacteriana, de pigmentação fotorreativa, de inibição do crescimento em meio contento ácido p-nitrobenzóico, de inibição do crescimento em meio contendo NaCl a 5%, de avaliação das temperaturas de crescimento, de crescimento em ágar nutriente, e teste de inibição do crescimento em meio de Sauton contendo ácido pícrico.
III. As espécies do complexo M. tuberculosis exibem alta similaridade fenotípica e não são distinguíveis pelos testes fenotípicos disponíveis.
Assinale:
I. As espécies M. tuberculosis e M. bovis apresentam padrões indistinguíveis.
II. No processo de análise por HPLC, os ésteres de ácidos micólicos são separados em coluna de fase reversa através de gradiente, e detectados por espectrometria UV.
III. Um extrato preparado a partir de cultura com M. fortuitum ATCC 6841 é recomendado para utilização como controle positivo e serve como padrão de referência para nomeação de picos obtidos na análise por espectrometria.
Assinale:
I. A pirazinamida exibe atividade bactericida in vitro apenas na presença de pH levemente ácido, propriedade importante para ação intracelular, atuando principalmente em células micobacterianas em replicação, sendo então utilizada nos dois primeiros meses de tratamento.
II. A rifampicina consiste em fármaco derivado semisintético do grupo das rifamicinas, que inclui a rifabutina e a rifapentina. Estes são antibióticos macrocíclicos complexos produzidos por Streptomyces mediterranei. O fármaco citado é também utilizado no tratamento de infecções por outros agentes bacterianos, como Neisseria meningitidis e Haemophilus influenzae, sendo que para Mycobacterium tuberculosis a concentração mínima inibitória é inferior.
III. A isoniazida tem ação bacteriostática para os bacilos de M. tuberculosis com metabolismo basal e bactericida para microrganismos em rápida multiplicação. O fármaco penetra com facilidade nas células e se mostra eficaz contra bacilos que crescem no interior das células. Consiste ainda em um fármaco notavelmente seletivo para as micobactérias, sendo também incluído na terapia de infecções por M. kansasii.
Assinale:
Em relação aos mecanismos de resistência, os mecanismos de ação dos fármacos e os mecanismos de resistência existente em variantes de M. tuberculosis, analise as afirmativas a seguir.
I. A isoniazida inibe a síntese de ácidos micólicos na parede celular de micobactérias por meio de mecanismos que envolvem unicamente a interação com produtos do gene inhA, que codifica uma enoil-ACP redutase II atuante na biossíntese lipídica. Mutações na sequência gênica do inhA são responsáveis pelo fenótipo de resistência.
II. A resistência microbiana à rifampicina decorre de uma alteração na sequência de aminoácidos do produto do gene, decorrente de mutações pontuais especialmente nos códons 507 e 533. Os mutantes bacterianos resistentes à rifampicina também apresentam maior virulência.
III. O etambutol bloqueia as arabinosil transferases envolvidas na biossíntese da parede celular de micobactérias. O fenótipo de resistência surge a partir de alterações na sequência de aminoácidos do gene embA.
Assinale:
I. O método XPert MTB/RIF consiste em um método automatizado utilizando um ensaio baseado em reação de polimerização em cadeia baseado em hemi-nested real time para amplificação parcial do gene rpoB e hibridação.
II. O teste é realizado em até duas horas, utilizando uma plataforma XPert MTB/RIF com integração do processamento do espécime e PCR em um único recipiente, contendo todos os reagentes para amplificação e detecção do produto amplificado.
III. O método exige a realização de etapas de lise bacteriana e extração do DNA por meio de protocolo simplificado anterior à utilização do cartucho para amplificação e detecção do produto amplificado.
Assinale:
I. A niacina (ácido nicotínico) funciona como co-fator de enzimas que atuam no processo de biossíntese de NAD e NADPH.
II. Cepas de M. tuberculosis com resultados negativos nesse teste são raras, porém já foram detectadas na prática laboratorial.
III. Cepas pertencentes às espécies de micobactérias não tuberculosas não acumulam ácido nicotínico no meio de cultura.
Assinale: