Questões de Concurso Público FIOCRUZ 2024 para Tecnologista em Saúde Pública - Imunodiagnóstico

Os ensaios ELISA são realizados em placas de poliestireno, tipicamente em placas de 96 poços revestidas para ligação forte de proteínas. Dependendo do tipo de ELISA, o teste requer um anticorpo de detecção primário e/ou secundário, analito/antígeno, anticorpo/antígeno de revestimento, tampão de lavagem e substrato/cromógeno. O anticorpo de detecção primário é um anticorpo específico que se liga apenas à proteína de interesse. Já o anticorpo de detecção secundário é um segundo anticorpo conjugado com enzima que se liga a um anticorpo primário não conjugado com enzima.
Nesse contexto, existem quatro etapas principais para a realização de um ensaio imunológico. É correto afirmar que NÃO faz parte de imunoensaios: 

Os testes rápidos ou PoCT (point-of-care tests) são testes para diagnósticos in vitro realizados de forma rápida, com baixa complexidade e, ainda, de fácil interpretação para uso em triagem, diagnóstico e monitoramento de pacientes. O exemplo mais básico de PoCT é o uso de tiras de teste, como as de urina, que são matrizes porosas secas com elementos de transporte impregnados que interagem com os analitos quando expostos. No caso de PoCT que utilizam anticorpos, das afirmativas abaixo, a que apresenta uma característica INCORRETA é: 

Os imunoensaios multiplex baseados em microesferas permitem a medição de múltiplos analitos em um pequeno volume de amostra em um único poço, otimizando a detecção e quantificação de múltiplos biomarcadores em comparação com imunoensaios como o ELISA.O componente que permite a identificação do analito que está sendo avaliado pelo sistema de leitura é: 

A técnica de imunofluorescência (IF) geralmente é utilizada para confirmação sorológica nos casos em que as reações antígeno – anticorpo podem ser observadas a partir da utilização de um fluorocromo conjugado às regiões da fração cristalizável (Fc) de uma molécula de anticorpo. Os complexos imunes contendo estes anticorpos marcados podem ser detectados pela emissão de luz fluorescente, quando excitadas por um feixe de menor comprimento de onda, que pode ser vista com o auxílio de um microscópio de fluorescncia após imobilização do material em lâminas.

Sobre este tema observe as afirmativas a seguir:

I - A técnica de imunofluorescência pode ser realizada em uma variedade de materiais clínicos, sempre que houver a presença de células que potencialmente possam estar infectadas com o vírus ou parasita de interesse.

II - Os materiais mais comumente utilizados para IF são: células de cultivo (após a inoculação com o material suspeito), tecidos de  necropsia ou biópsia (impressão direta de tecido na lâmina-clap), tecidos congelados e cortados no criostato (tecidos fixados em formol e incluí dos em parafina), células sanguíneas (leucó citos) e células presentes em secreções (nasais, prepuciais, vaginais, e no leite).

III - Na IF indireta, geralmente utiliza-se anticorpo policlonal, ou anticorpos monoclonais marcados com fluoresceína para detecção de antígenos. A IF indireta tem como vantagens a rapidez e simplicidade, por exemplo, em alguns protocolos o resultado é obtido em menos de uma hora.

IV - Na IF direta o material a ser analisado é fixado em lâminas de microscópio. As células (portadoras de antígenos) são incubadas com o soro que se deseja testar, sendo então tratadas com outro soro que contenha anticorpos específicos para imunoglobulina humana (anti-Ig) conjugada a um fluorocromo, como a fluoresceína. A presença de anticorpos é revelada por meio de microscopia de fluorescência.

Das afirmativas acima, apenas:

Ao final da dé cada de 1980, chegaram ao mercado os testes rápidos. Com o avanço das tecnologias de desenvolvimento e produção, esses testes revelaram-se eficientes na investigação de doenças infectocontagiosas. São chamados de testes rápidos os ensaios de triagem que produzem resultados em, no máximo, 30 minutos, de fácil execução e dispensando infraestrutura laboratorial. Apesar da metodologia simples, estes produtos são baseados em princípios técnicos relativamente complexos para oferecer a oportunidade de acesso a resultados importantes obtidos longe de grandes hospitais ou instalações laboratoriais, onde há́ necessidade de obtenção de resultados de forma imediata.
Em relação aos testes rápidos, avalie se são verdadeiras (V) ou falsas (F) as afirmativas a seguir:

I - O teste rápido tradicional é um ensaio que se vale da tecnologia de imunocromatografia de fluxo lateral (Lateral Flow, LF), realizado a partir de amostra de sangue total venoso ou obtido a partir de punção digital, de soro ou plasma.
II - Nos testes rápidos para detecção de anticorpos várias nanopartículas são usadas como marcadores biológicos, sendo as de ouro coloidal as mais utilizadas em sistemas biotecnológicos devido às suas excelentes características físicas e químicas.

III - Nos testes rápidos, a capacidade de detecção pode ser antecipada e a sensibilidade pode ser ampliada com a alteração dos insumos utilizados visando à detecção de antígenos ao invés de anticorpos. O princípio básico do teste permanece o mesmo, mas a membrana recebe anticorpos (geralmente monoclonais) que reconhecem com avidez os antígenos.

As afirmativas I, II e III são respectivamente: