Questões de Concurso

Quanto à técnica de Western Blot, analise as afirmativas a seguir. I. Na análise de proteínas por eletroforese em condições desnaturantes, os polipeptídios ligam-se ao reagente SDS (dodecil sulfato de sódio) e tornam-se carregados negativamente. II. Na transferência de polipeptídios do gel de poliacrilamida para membranas de nitrocelulose é importante que a membrana esteja próxima ao eletrodo negativo, uma vez que a transferência se dá do polo positivo para o negativo. III. O substrato cromógeno NBT/BCIP é um dos mais utilizados para revelar os anticorpos conjugados à peroxidase. Está correto o que se afirma em

Em relação às técnicas de amplificação mediada por transcrição (TMA) e de amplificação baseada na sequência de ácido nucleico (NASBA), analise as afirmativas a seguir e assinale (V) para a verdadeira e (F) para a falsa.
( ) TMA se baseia em um ciclo contínuo isotérmico de amplificação, no qual a transcriptase reversa produz fitas de cDNA e, em seguida, a RNA polimerase; a partir deste, sintetiza novas fitas de RNA. ( ) Para diagnóstico de M. tuberculosis, TMA é mais sensível que PCR pelo fato de detectar sequências de rRNA que possuem um número maior de cópias por célula do que o DNA. ( ) NASBA, ao contrário de TMA, depende do uso de termocicladores uma vez que há temperaturas diferentes de desnaturação, anelamento e extensão.
As afirmativas são, na ordem apresentada, respectivamente,

Em relação à reação de PCR, analise as afirmativas a seguir e assinale (V) para a verdadeira e (F) para a falsa.
( ) As etapas fundamentais de uma reação de PCR são a desnaturação térmica do DNA molde, o anelamento do oligonucleotídeo iniciador às fitas moldes e a extensão ou polimerização das novas fitas de DNA que utilizam os dNTPs como substrato da reação de polimerização. ( ) O magnésio é um cofator da enzima DNA polimerase, sendo sua concentração fundamental para a correta realização da reação de PCR. O ajuste incorreto da quantidade deste íon pode gerar artefatos na reação, uma vez que concentrações baixas de Mg podem impedir a desnaturação completa do molde de DNA, além de diminuir a especificidade da reação; já concentrações altas de Mg não permitem a realização da reação. ( ) A concentração de dNTPs (dATP, dCTP, dGDP e dTTP) deve ser calculada de modo que dCTP e dGDP tenham o dobro da concentração dos demais desoxirribonucleotídeos.
As afirmativas são, na ordem apresentada, respectivamente,